烟粉虱卵黄原蛋白通过影响自噬反应调控共生细菌Rickettsia的丰度

【目的】探明烟粉虱Bemisia tabaci卵黄原蛋白(vitellogenin, BtVg)调控共生细菌Rickettsia丰度的分子机制。【方法】通过显微注射烟粉虱MEAM1隐种雌成虫dsRNA对BtVg进行RNAi,采用qRT-PCR检测烟粉虱MEAM1隐种雌成虫BtVg和自噬基因BtAtg8的表达量，统计雌成虫死亡率，采用qPCR检测雌成虫中Rickettsia的丰度，采用免疫荧光标记显微镜技术检测BtVg和BtAtg8在雌成虫卵巢管中的定位和表达以及Rickettsia在卵巢管和中肠中的丰度。饲喂烟粉虱MEAM1隐种雌成虫含雷帕霉素(10μmol/L)的人工饲料诱导自噬后，采用免疫荧光标记显微镜技术检测BtAtg8在卵巢管中的表达和定位，采用qPCR检测卵巢中Rickettsia丰度。【结果】与显微注射dsGFP的对照相比，显微注射dsBtVg后3 d时烟粉虱MEAM1隐种雌成虫BtVg的表达量显著降低，BtAtg8的表达量显著升高，死亡率显著升高，Rickettsia丰度显著降低，卵巢管中BtVg表达量明显降低，BtAtg8表达量明显升高，Rickettsia在卵巢管和中...