| 梨小食心虫化学感受蛋白cDNA的克隆、序列分析及原核表达 |
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| 引用本文： | 张国辉,刘彦飞,仵均祥.梨小食心虫化学感受蛋白cDNA的克隆、序列分析及原核表达[J].昆虫学报,2012,55(6):668-675. |
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| 作者姓名： | 张国辉 刘彦飞 仵均祥 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学植物保护学院,植保资源与病虫害治理教育部重点实验室/西北农林科技大学应用昆虫学重点实验室,陕西杨凌712100 |
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| 基金项目： | 农业部公益性行业(农业)科研专项 |
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| 摘 要： | 为了研究梨小食心虫Grapholita molesta化学感受蛋白（chemosensory proteins, CSPs）在化学感受系统中的作用， 本研究利用RT-PCR和RACE技术克隆到一条梨小食心虫化学感受蛋白的全长cDNA序列， 命名为GmolCSP （GenBank 登录号： JQ821389）。序列分析表明， GmolCSP开放阅读框序列为384 bp， 编码127个氨基酸残基， 预测N末端含有18个氨基酸组成的信号肽序列， 其成熟蛋白的预测分子量为12.80 kD， 等电点为8.33。该基因编码的氨基酸序列与其他鳞翅目昆虫化学感受蛋白的氨基酸序列具有较高同源性。RT-PCR结果显示， GmolCSP在梨小食心虫成虫触角、 去触角的头、 胸、 腹、 足和翅中都有表达。将GmolCSP重组到表达载体pET-32a中， 转入大肠杆菌Escherichia coli BL21（DE3）进行表达。SDS-PAGE和Western 印迹检测结果显示， 梨小食心虫化学感受蛋白基因在大肠杆菌中成功地表达出一个分子量约为29 kD的融合蛋白， 与预测的融合蛋白分子量大小一致。本研究结果为进一步研究该蛋白的分子结构和功能奠定了良好基础。
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| 关 键 词： | 梨小食心虫 化学感受蛋白 分子克隆 序列分析 原核表达 融合蛋白 |
cDNA cloning, sequence analysis and prokaryotic expression of a chemosensory protein from the oriental fruit moth, Grapholita molesta ( Lepidoptera: Tortricidae) |
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| ZHANG Guo-Hui
,
LIU Yan-Fei
,
WU Jun-Xiang.cDNA cloning, sequence analysis and prokaryotic expression of a chemosensory protein from the oriental fruit moth, Grapholita molesta ( Lepidoptera: Tortricidae)[J].Acta Entomologica Sinica,2012,55(6):668-675. |
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| Authors: | ZHANG Guo-Hui LIU Yan-Fei WU Jun-Xiang |
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| Institution: | *(Key Laboratory of Plant Protection Resources and Pest Management,Ministry of Education/Key Laboratory of Applied Entomology,College of Plant Protection,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Grapholita molesta" target="_blank">Grapholita molesta')" href="#">Grapholita molesta chemosensory protein molecular cloning sequence analysis prokaryotic expression fusion protein |
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