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青杨脊虎天牛CYP4G2基因片段的克隆、序列分析与表达
引用本文:关桦楠,迟德富,宇佳,李晓灿.青杨脊虎天牛CYP4G2基因片段的克隆、序列分析与表达[J].昆虫学报,2008,51(4):357-364.
作者姓名:关桦楠  迟德富  宇佳  李晓灿
作者单位:东北林业大学生命科学学院,哈尔滨,15040
基金项目:国家自然科学基金 , 黑龙江省科技攻关项目 , 黑龙江省杰出青年科学基金
摘    要:根据报道的十几种昆虫CYP4家族基因的氨基酸序列保守区域设计一对引物,利用RT-PCR技术扩增编码青杨脊虎天牛Xylotechus rusticus中肠细胞色素氧化酶CYP4G2蛋白的cDNA片段,构建原核表达载体pET-CYP4G2,将其转化入大肠杆菌Escherichia coli JM109中表达。序列分析结果表明,该基因(CYP4G2,GenBank登录号为EF429250)保守区域阅读框全长387 bp,编码129个氨基酸残基,预测分子量和等电点分别为16.9 kD和5.75;推导的氨基酸序列与已报道的昆虫CYP4家族氨基酸序列一致性较高(63%~86%),且具有细胞色素氧化酶的典型特征。IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳检测到一条22 kD大小的外源蛋白,与预测融合蛋白的分子量大小相应。CO差光谱分析证明重组菌表达了有活性的pET-CYP4G2。

关 键 词:青杨脊虎天牛  细胞色素P450酶系  CYP4G2基因  克隆  表达  

Cloning, sequencing, and expression of cDNA fragments of CYP4G2 from Xylotechus rusticus L. (Coleoptera: Cerambycidae) in Escherichia coli
GUAN Hua-Nan,CHI De-Fu,YU Jia,LI Xiao-Can.Cloning, sequencing, and expression of cDNA fragments of CYP4G2 from Xylotechus rusticus L. (Coleoptera: Cerambycidae) in Escherichia coli[J].Acta Entomologica Sinica,2008,51(4):357-364.
Authors:GUAN Hua-Nan  CHI De-Fu  YU Jia  LI Xiao-Can
Abstract:
Keywords:Xylotechus rusticus  cytochrome P450  CYP4G2  cloning  expression
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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