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| 甜菜夜蛾羧酸酯酶基因cDNA的克隆、表达及序列分析 | |
| 引用本文： | 张霞,郭巍,李国勋,宋水山.甜菜夜蛾羧酸酯酶基因cDNA的克隆、表达及序列分析[J].昆虫学报,2008,51(7):681-688. |
| 作者姓名： | 张霞 郭巍 李国勋 宋水山 |
| 作者单位： | 1. 河北农业大学生命科学学院/河北省农作物病虫害生物防治工程技术中心,河北保定,071000;河北省生物研究所,石家庄,050051 2. 河北农业大学生命科学学院/河北省农作物病虫害生物防治工程技术中心,河北保定,071000 3. 河北农业大学生命科学学院/河北省农作物病虫害生物防治工程技术中心,河北保定,071000;青岛农业大学,山东青岛,266109 4. 河北省生物研究所,石家庄,050051 |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划),河北省自然科学基金 |
| 摘 要： | 羧酸酯酶是昆虫体内重要的解毒酶系之一,与昆虫抗药性产生相关。利用粉纹夜蛾Trichoplusia ni (Hübner)肠粘蛋白多克隆抗体免疫筛选甜菜夜蛾Spodoptera exigua (Hübner)中肠cDNA表达文库,得到编码羧酸酯酶的全长cDNA克隆。该cDNA克隆全长1 812 bp(GenBank登录号EF580101),开放阅读框长1 605 bp,编码535个氨基酸。该蛋白活性中心包括3个氨基酸残基（催化三联体）： Ser186, Glu319和His443, 3个N-联糖基化位点,具备羧酸酯酶的结构特征,属羧酸酯酶家族（EC: 3.1.1.-）。将该基因与pQE30载体重组,经IPTG诱导,spot-blot鉴定,蛋白获得了表达;以α-醋酸萘酯为底物,检测表达的羧酸酯酶活性为1.3 nmol/100 μL酶液。 |
| 关 键 词： | 甜菜夜蛾 cDNA表达文库 羧酸酯酶 表达 spot-blot鉴定 |
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