碱性果胶酶在重组毕赤酵母中高效表达的关键因素研究 |
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作者姓名: | 王芸 华兆哲 刘立明 堵国成 陈坚 |
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作者单位: | 1. 江南大学工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214122 2. 江南大学工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214122;江南大学食品科学技术国家重点实验室,无锡,214122 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展计划(973计划);国家自然科学基金 |
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摘 要: | 为提高重组毕赤酵母生产碱性果胶酶的产量和生产强度,在摇瓶条件下优化了重组毕赤酵母生产碱性果胶酶的关键因素。结果表明,以下条件:初始甘油浓度40g/L、初始甲醇浓度3.1g甲醇/gDCW、每24h添加0.51g甲醇/gDCW、诱导表达周期72h、250mL三角瓶诱导培养基装液量30mL、初始pH6,0,最适于菌体生长与产物表达。在此基础上,7L罐上通过恒速流加甘油进一步提高细胞密度,诱导阶段甲醇采取前期恒速流加和后期DO-stat,发酵结束菌体干重达80g/L,酶活为217U/mL,比摇瓶结果提高了66.2%。
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关 键 词: | 碱性果胶酶 重组毕赤酵母 高效表达 甲醇诱导 |
修稿时间: | 2007-08-11 |
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