| 抗人Elp3 的N末端抗体制备及在染色质免疫沉淀中的应用 |
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| 引用本文： | 李 芬,田树娟,许 森,武玉光,孔 艳,张 帅,王艳芳.抗人Elp3 的N末端抗体制备及在染色质免疫沉淀中的应用[J].中国生物化学与分子生物学报,2009,25(10):919-925. |
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| 作者姓名： | 李 芬 田树娟 许 森 武玉光 孔 艳 张 帅 王艳芳 |
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| 作者单位： | 河南师范大学生命科学学院,新乡453007 |
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| 摘 要： | 人 Elp3（human elongator protein 3, hElp3）具有组蛋白乙酰转移酶活性，是与延伸中的 RNA 聚合酶Ⅱ结合的 elongator 复合物的催化亚基，可参与组蛋白的乙酰化修饰与基因的转录延伸. Elp3 及其复合物功能异常与人类多种疾病相关. 为运用染色质免疫沉淀等手段深入研究 Elp3 功能，PCR 法克隆 pYES2-hElp3 质粒中编码 hElp3的N端亲水区段（1～69 氨基酸残基），构建原核表达载体 pMXB10-hElp3-210，经 IPTG 诱导和几丁质柱纯化后，免疫兔制备多克隆抗体. ELISA 检测显示，该抗体有较高的效价(不低于1∶2 500).免疫印迹实验结果表明，该抗体可与纯化的及 HeLa 细胞中的 hElp3 蛋白特异性结合.运用该抗体对转入 elp3Δ菌株的人 Elp3 的染色质免疫沉淀实验结果表明，人 Elp3 可参与酵母 SSA3 基因的转录调控，这可能是人Elp3 能够部分补偿酵母 SSA3 基因延迟表达缺陷的原因.
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| 关 键 词： | hElp3 原核表达 多克隆抗体 染色质免疫沉淀分析 |
| 收稿时间： | 2009-3-20 |
| 修稿时间： | 2009-6-23 |
Preparation of Polyclonal Antibody Against N-terminal of Human Elp3 and Its Application in Chromatin Immunoprecipitation |
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| LI Fen,TIAN Shu-Juan,XU Sen,WU Yu-Guang,KONG Yan,ZHANG Shuai,WANG Yan-Fang.Preparation of Polyclonal Antibody Against N-terminal of Human Elp3 and Its Application in Chromatin Immunoprecipitation[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2009,25(10):919-925. |
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| Authors: | LI Fen TIAN Shu-Juan XU Sen WU Yu-Guang KONG Yan ZHANG Shuai WANG Yan-Fang |
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| Institution: | CollegeofLifeSciences,HenanNormalUniversity,Xinxiang453007,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hElp3 prokaryotic expression polyclonal antibody chromatin immunoprecipitation assay |
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