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家蚕B类清道夫受体BmSCRB8基因的克隆及表达
引用本文:赵羽卒,张奎,唐梅,徐曼,李重阳,潘光照,申利,崔红娟,杨丽群.家蚕B类清道夫受体BmSCRB8基因的克隆及表达[J].生物工程学报,2016,32(10):1408-1421.
作者姓名:赵羽卒  张奎  唐梅  徐曼  李重阳  潘光照  申利  崔红娟  杨丽群
作者单位:西南大学 家蚕基因组生物学国家重点实验室,重庆 400716,西南大学 家蚕基因组生物学国家重点实验室,重庆 400716,西南大学 家蚕基因组生物学国家重点实验室,重庆 400716,西南大学 家蚕基因组生物学国家重点实验室,重庆 400716,西南大学 家蚕基因组生物学国家重点实验室,重庆 400716,西南大学 家蚕基因组生物学国家重点实验室,重庆 400716,西南大学 家蚕基因组生物学国家重点实验室,重庆 400716,西南大学 家蚕基因组生物学国家重点实验室,重庆 400716,西南大学 家蚕基因组生物学国家重点实验室,重庆 400716
基金项目:国家重点基础研究发展计划 (973计划) (No. 2012CB114603),国家自然科学基金 (No. 81201551),中央高校基本科研业务费专项资金 (No. XDJK2013B020),中央高校基本科研业务费专项资金学科团队项目 (No. 2362015XK09),重庆市研究生科研创新项目 (No. CYB2015067),西南大学基本科研业务费专项资金 (No. XDJK2015D021) 资助。
摘    要:B类清道夫受体在动脉粥样硬化及其他心血管疾病的形成或抑制,机体免疫防御,凋亡细胞清除等生理过程中起着重要的作用。克隆了家蚕B型清道夫受体家族的一个成员BmSCRB8基因,通过RACE技术获得BmSCRB8的c DNA全长为2 668 bp,其ORF为1 704 bp,编码567个氨基酸,通过在线预测其蛋白分子量为63.87 k Da,等电点为6.06。采用RT-PCR方法得到了BmSCRB8的时空表达谱,结果表明BmSCRB8在家蚕各组织以及血液各时期均有表达,且在脂肪体中表达量最高,变态发育时期表达量较高。原核表达获得BmSCRB8重组蛋白,并经由蛋白纯化、免疫小鼠后制备得到家蚕BmSCRB8多克隆抗体。同时构建了BmSCRB8真核表达载体并转染家蚕胚胎细胞系。免疫荧光及过表达结果显示BmSCRB8主要定位于细胞膜上,Western blotting结果显示免疫小鼠后所得到的抗血清可特异性识别BmSCRB8蛋白。

关 键 词:家蚕,BmSCRB8,表达谱,多克隆抗体,亚细胞定位
收稿时间:2016/1/12 0:00:00

Cloning and expression of scavenger receptor class B BmSCRB8 in silkworm Bombyx mori
Yuzu Zhao,Kui Zhang,Mei Tang,Man Xu,Chongyang Li,Guangzhao Pan,Li Shen,Hongjuan Cui and Liqun Yang.Cloning and expression of scavenger receptor class B BmSCRB8 in silkworm Bombyx mori[J].Chinese Journal of Biotechnology,2016,32(10):1408-1421.
Authors:Yuzu Zhao  Kui Zhang  Mei Tang  Man Xu  Chongyang Li  Guangzhao Pan  Li Shen  Hongjuan Cui and Liqun Yang
Institution:State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400716, China,State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400716, China,State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400716, China,State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400716, China,State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400716, China,State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400716, China,State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400716, China,State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400716, China and State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400716, China
Abstract:
Keywords:bombyx mori  BmSCRB8  expression profile  polyclonal antibody  subcellular localization
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