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西方马脑炎核酸疫苗表达载体构建及免疫原性研究
引用本文:马金柱,王化磊,郑学星,吴红霞,赵永坤,王铁成,杨松涛,夏咸柱.西方马脑炎核酸疫苗表达载体构建及免疫原性研究[J].激光生物学报,2013,22(3):243-248.
作者姓名:马金柱  王化磊  郑学星  吴红霞  赵永坤  王铁成  杨松涛  夏咸柱
作者单位:1. 黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江大庆163319;军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春130122;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030
2. 军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春,130122
3. 军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春130122;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030
基金项目:公益性行业(农业)科研专项,"十一五"国家科技支撑计划重点项目
摘    要:为构建西方马脑炎病毒(western equine encephalomyelitis virus,WEEV)结构基因C-E3-E2-6k-E1重组真核表达载体,并研究其作为核酸疫苗的免疫原性.采用PCR方法扩增目的基因,酶切之后连接到pcDNA3.1上构建真核表达载体pcDNA3.1-C-E,用酶切和测序分析方法鉴定正确后,重组质粒被转染到293T细胞,经电镜检测和间接免疫荧光方法证明基因可以表达后,用该重组质粒免疫小鼠,免疫后检测实验组小鼠外周血中CD4+T细胞/CD8+T细胞比例和血清中细胞因子IL-2、IL-4及IFN-γ浓度,以上实验组各项免疫指标与对照组相比差异均显著(P< 0.05);ELISA方法检测实验组小鼠血清中WEEV的IgG抗体效价是1∶16.研究结果表明重组质粒pcDNA3.1-C-E可在细胞中获得瞬时表达,并且重组质粒作为核酸疫苗能够刺激小鼠产生免疫反应,具有较强免疫原性,为今后WEEV核酸疫苗研制奠定了良好基础.

关 键 词:西方马脑炎病毒  载体构建  核酸疫苗  免疫原性

Construction and Immunogenicity of Recombinant Expression Vectors of Western Equine Encephalomyelitis Virus
Abstract:
Keywords:western equine encephalomyelitis virus  vector construction  DNA vaccine  immunogenicity
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