Ang Ⅱ通过激活Notch1/Sox2通路对肝星状细胞LX2的活化和增殖的作用

目的探讨Ang Ⅱ通过靶向调控Notch1/Sox2肝星状细胞LX2细胞的增殖。方法通过CCK8检测Ang Ⅱ对肝星状细胞增殖能力的影响,通过羟脯氨酸酸法检测Ang Ⅱ对肝星状细胞胶原合成能力的影响,并通过脂质体转染siRNA-Notch1构建Notch1低表达细胞模型,通过CCK8检测敲低Notch1对Ang Ⅱ诱导的肝星状细胞LX2增殖的影响,通过Western Blot检测敲低Notch1对Ang Ⅱ诱导的肝星状细胞LX2蛋白表达的影响。所有的检测结果都进行生物学重复。采用方差分析和t检验进行统计学分析。结果 CCK8结果显示,Ang Ⅱ(5、10、20、40、80 nmol/L)预处理A450值分别为0.67±0.06、0.88±0.07、0.98±0.07、1.08±0.07、1.23±0.07,较对照组0.57±0.05上升,差异具有统计学意义(F=45.76,P 0.01),羟脯氨酸检查结果显示,Ang Ⅱ(10、20、40 nmol/L)预处理组羟脯氨酸浓度分别为(2.60±0.20)、(3.47±0.25)、(4.17±0.21)mg/L,羟脯氨酸浓度较对照组(1.90±0.10)mg/L上升,差异具有统计学意义(F=75.18,P 0.01)。Western Blot结果显示,Ang Ⅱ10、20、40 nmol/L组Notch1蛋白表达水平分别为0.20±0.02、0.54±0.04、0.82±0.03,与正常对照组0.11±0.02发生升高,差异具有统计学意义(F=400.50,P 0.01)。Notch1干扰后,CCK8结果显示,siRNA-Notch1+Ang Ⅱ组(10、20、40 nmol/L)A450值分别为0.53±0.06、0.83±0.03、1.03±0.03,与siRNA-NC+Ang Ⅱ对照组0.97±0.06,1.43±0.06,1.73±0.06比较发生降低(P 0.01)。进一步Western Blot结果显示,Notch1敲低组(Ang Ⅱ+siRNA-Notch1)Notch1、HES1和Sox2蛋白表达水平分别为1.47±0.12、0.77±0.06和0.50±0.10,分别与Ang Ⅱ对照组2.83±0.15、2.20±0.10和1.17±0.06比较,差异具有统计学意义(P 0.01)。结论 Ang Ⅱ通过激活Notch1/Sox2信号促进肝星状细胞LX2增殖。