PCR条件及程序改变对抗体库多样性的影响 |
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作者姓名: | 田学军 寿成超 孟麟 董志伟 |
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作者单位: | 1. 北京医科大学临床肿瘤学院,北京,100034 2. 中国医学科学院肿瘤研究所,北京,100021 |
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基金项目: | 国家“863”高技术项目资助(编号86310209). |
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摘 要: | 用家族特异性免疫球蛋白可变区基因引物两两组合分别对轻、重链进行RT-PCR扩增. 在不同退火温度下得到了全部轻链及大部分重链(13/16)可变区基因. 当先用免疫球蛋白信号肽序列5′-端引物与未扩出基因3′-端引物组合进行一次PCR,再以该产物为模板进行二次PCR,则获得了未扩出三条重链的PCR产物. 这表明通过PCR反应条件的改变及程序调整,可增加所获得可变区基因的种类及数量,从而增加抗体库的多样性.
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关 键 词: | 退火温度 抗体库 多样性 半套式PCR |
收稿时间: | 1998-03-16 |
修稿时间: | 1998-08-03 |
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