人肠组织特异抗原A33基因5′调控区的克隆及其功能分析 |
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作者姓名: | 山松 翟鹏 朱云艳 毛泽斌 童坦君 |
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作者单位: | 北京大学医学部生物化学与分子生物学系 北京100083
(山松,翟鹏,朱云艳,毛泽斌),北京大学医学部生物化学与分子生物学系 北京100083(童坦君) |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目 (No .30 0 0 0 199) |
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摘 要: | 用基因组步行法 (genomewalker)克隆了人A33抗原基因的 5′调控区 94 0bp片段 ,并用PCR法鉴定了这一克隆的正确性 .将该序列提交GenBank ,登录号为AF2 0 0 6 2 6 .用引物延伸法 (primerex tension)确定了A33基因的转录起始位点 ,发现该位点位于一个TATA盒下游 10个碱基处 .以增强型绿色荧光蛋白为报告基因构建了不同长度的A33启动子 5′缺失载体 ,用脂质体介导的方法将这些载体转染LoVo、HeLa、2 93等细胞 ,比较了EGFP的表达水平 .研究发现 ,A33启动子上主要转录调控元件以及与组织特异性表达相关的转录调控元件位于A33启动子的 - 10 4~ + 2 5bp区域
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关 键 词: | A33基因 组织特异性抗原 启动子区 克隆 转录调控 |
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