| 家蝇Thymosin(THY)基因的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 王宇,吴高吉,罗曼,彭传林,修江帆,尚小丽,吴建伟. 家蝇Thymosin(THY)基因的克隆及原核表达[J]. 生物技术通报, 2015, 0(2): 143-147 |
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| 作者姓名： | 王宇 吴高吉 罗曼 彭传林 修江帆 尚小丽 吴建伟 |
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| 作者单位： | 1. 贵阳医学院基础医学院，贵阳 550004; 贵州省疾病预防控制中心，贵阳 550004
2. 贵阳医学院基础医学院,贵阳,550004 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划，国家自然科学基金项目 |
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| 摘 要： | 采用EST测序技术从构建的家蝇(Musca domestica)幼虫c DNA质粒文库中筛选到胸腺肽(Thymosin,THY)基因,以该基因的c DNA文库质粒为模板,设计引物,通过PCR扩增,测序鉴定,获得THY基因完整编码序列。运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白的基本理化性质、信号肽和亚细胞定位等方面进行预测和分析。构建p ET-28a(+)-THY重组质粒,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。研究结果表明,THY基因ORF全长384 bp,编码127个氨基酸,理论分子量14.3 k D,等电点为5.22,具有THY家族的蛋白保守结构域。构建重组原核质粒p ET-28a(+)-THY,经IPTG诱导,蛋白在大肠杆菌中获得表达,经亲和层析柱纯化获得目的蛋白,Western blot检测发现纯化的目的蛋白大小正确。
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| 关 键 词： | 家蝇 胸腺肽 克隆 原核表达 |
Cloning and Prokaryotic Expression of Musca domestica Thymosin Gene |
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| Wang Yu,Wu Gaoji,Luo Man,Peng Chuanlin,Xiu Jiangfan,Shang Xiaoli,Wu Jianwei. Cloning and Prokaryotic Expression of Musca domestica Thymosin Gene[J]. Biotechnology Bulletin, 2015, 0(2): 143-147 |
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| Authors: | Wang Yu Wu Gaoji Luo Man Peng Chuanlin Xiu Jiangfan Shang Xiaoli Wu Jianwei |
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| Affiliation: | Wang Yu;Wu Gaoji;Luo Man;Peng Chuanlin;Xiu Jiangfan;Shang Xiaoli;Wu Jianwei;Basic Medical College,Guiyang Medical College;Guizhou Provincial Center for Disease Control Prevention; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Musca domestica thymosin cloning prokaryotic expression |
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