| 小麦TaCIPK8基因的表达分析及其与TaCBLs的互作 |
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| 引用本文： | 毕惠惠,贺亚伟,毛伟伟,翟俊鹏,罗肖艳,陈树林,许海霞,程西永.小麦TaCIPK8基因的表达分析及其与TaCBLs的互作[J].植物遗传资源学报,2018,19(2):296-304. |
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| 作者姓名： | 毕惠惠 贺亚伟 毛伟伟 翟俊鹏 罗肖艳 陈树林 许海霞 程西永 |
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| 作者单位： | 河南农业大学农学院/河南省粮食作物协同创新中心/小麦玉米作物学国家重点实验室,河南农业大学农学院/河南省粮食作物协同创新中心/小麦玉米作物学国家重点实验室,河南农业大学农学院/河南省粮食作物协同创新中心/小麦玉米作物学国家重点实验室,河南农业大学农学院/河南省粮食作物协同创新中心/小麦玉米作物学国家重点实验室,河南农业大学农学院/河南省粮食作物协同创新中心/小麦玉米作物学国家重点实验室,河南农业大学农学院/河南省粮食作物协同创新中心/小麦玉米作物学国家重点实验室,河南农业大学农学院/河南省粮食作物协同创新中心/小麦玉米作物学国家重点实验室,河南农业大学农学院/河南省粮食作物协同创新中心/小麦玉米作物学国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 转基因生物新品种培育重大专项(2016ZX08002003-004)；973 计划(2014CB138105) |
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| 摘 要： | CIPK是植物钙感受器钙调磷酸酶B类似蛋白特定靶向的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。根据拟南芥At CIPK8基因序列,利用同源克隆的方法从抗逆性较强的小麦品种石4185中克隆了一个编码序列全长为1350 bp的蛋白激酶基因Ta CIPK8(Gen Bank号:KJ561804.1)。序列分析表明该基因编码的蛋白含有449个氨基酸,分子量为52.24 k D,理论等电点为7.16,具有CIPKs家族蛋白所特有的N端激酶域和C端NAF/FISL结构域;与拟南芥At CIPK8蛋白序列相似度达83.5%。为进一步研究其功能,采用Real-time PCR方法检测该基因在胁迫条件下的响应情况,发现Ta CIPK8基因受高盐、外源ABA和低温(4℃)胁迫诱导表达。利用植物启动子数据库Plant CARE和PLACE对Ta CIPK8基因启动子序列进行分析,结果显示Ta CIPK8基因启动子存在大量应答脱水胁迫、干旱、低温和ABA的顺式作用元件,也存在一些响应激素GA和茉莉酸甲酯的元件。利用酵母双杂交方法研究Ta CIPK8和Ta CBL家族蛋白的互作,结果显示,共转化含有Ta CIPK8和Ta CBL3基因载体的酵母菌能够在SD/-Trp/-Leu、SD/-Trp/-Leu/X-α-Gal/Ab A和SD/-Trp/-Leu/-Ade/-His/X-α-Gal/Ab A三种培养基上生长,且在后两种培养基上长出蓝色菌落。结果说明Ta CIPK8与Ta CBL3发生了互作,进而引起了报告基因MEL1、AUR1-C、HIS3和ADE2的表达。该研究结果对于研究Ta CIPK8基因的功能以及与CBL蛋白的互作调控网络具有一定的参考作用。
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| 关 键 词： | TaCIPK8 TaCBLs 基因克隆 表达分析 酵母双杂交 |
| 收稿时间： | 2017/9/3 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2018/1/28 0:00:00 |
Expression analysis of TaCIPK8 gene and its interaction with TaCBLs in wheat |
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| Institution: | National Key Laboratory of Wheat and Maize Crop Science,Collaborative Innovation Center of Henan Grain Crops,Agronomy College of Henan Agricultural University,Zhengzhou,450002 Henan Agricultural University,National Key Laboratory of Wheat and Maize Crop Science,Collaborative Innovation Center of Henan Grain Crops,Agronomy College of Henan Agricultural University,Zhengzhou,450002 Henan Agricultural University,,National Key Laboratory of Wheat and Maize Crop Science,Collaborative Innovation Center of Henan Grain Crops,Agronomy College of Henan Agricultural University,Zhengzhou,450002 Henan Agricultural University,National Key Laboratory of Wheat and Maize Crop Science,Collaborative Innovation Center of Henan Grain Crops,Agronomy College of Henan Agricultural University,Zhengzhou,450002 Henan Agricultural University,National Key Laboratory of Wheat and Maize Crop Science,Collaborative Innovation Center of Henan Grain Crops,Agronomy College of Henan Agricultural University,Zhengzhou,450002 Henan Agricultural University,National Key Laboratory of Wheat and Maize Crop Science,Collaborative Innovation Center of Henan Grain Crops,Agronomy College of Henan Agricultural University,Zhengzhou,450002 Henan Agricultural University,National Key Laboratory of Wheat and Maize Crop Science,Collaborative Innovation Center of Henan Grain Crops,Agronomy College of Henan Agricultural University,Zhengzhou,450002 Henan Agricultural University |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | TaCIPK8 TaCBLs Gene cloning Expression analysis Yeast two hybrid |
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