人纤溶酶原Kringle5在酵母中的表达及其活性研究 |
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作者姓名: | 陶亦敏 张颉 唐亮 陈宇光 谈立松 |
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作者单位: | 1. 上海大学生命科学学院,上海200436 2. 上海市第一肺科医院肺癌免疫研究室,上海200433 |
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基金项目: | 上海市卫生局课题基金(项目号99425)资助 |
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摘 要: | 抽提人肝组织总RNA,通过RT-PCR方法扩增出纤溶酶原Kringle5片段,将其和分泌表达载体pPIC9K相连,转化毕赤酵母GS115,筛选获得在酵母细胞中遗传稳定表达Kringle5重组蛋白的工程菌。经甲醇诱导表达5d后,发酵液总蛋白分泌量约120mg/L,SDS-PAGE呈现相对分子质量约为15×103特异表达带。经Ni-NTA-Agarose纯化后,重组蛋白对人脐静脉内皮细胞有明显的抑制作用,ID50约为4.0μg/ml。
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关 键 词: | 纤溶酶原 Kringle 5 毕赤酵母 基因表达 活性 内皮细胞增殖抑制 |
文章编号: | 1009-0002(2002)02-0112-03 |
修稿时间: | 2001-11-07 |
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