| 基于CRISPR/Cas9系统的拟南芥双链结合蛋白AtHyl1基因编辑 |
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| 引用本文： | 武亚丹,吴坤鑫,张春微,刘志昕,余乃通,王健华,张秀春.基于CRISPR/Cas9系统的拟南芥双链结合蛋白AtHyl1基因编辑[J].基因组学与应用生物学,2019,38(6):2672-2676. |
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| 作者姓名： | 武亚丹 吴坤鑫 张春微 刘志昕 余乃通 王健华 张秀春 |
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| 作者单位： | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所,农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室,海口,571101;海南大学热带农林学院,海口,5702281;中国热带农业科学院热带生物技术研究所,农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室,海口,571101 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | RNA沉默是植物重要的抗病毒防御机制,双链RNA结合蛋白(dsRNA-binding proteins, DRB)是RNA沉默信号途径中的关键蛋白。DRB1/HYL1是拟南芥基因组编码的7个DRBs之一,本研究将人工合成含2个AtHyl1靶位点序列的串联t RNA-gRNA片段导入CRISPR/Cas9表达载体中,构建双靶点的CRISPR/Cas9表达载体,通过转化拟南芥dcl2drb4双突变体获得36株转基因阳性植株。对经测序分析可能已发生基因编辑的3株进行单克隆测序分析,测序结果表明均已发生编辑,获得了AtHyl1基因被编辑的拟南芥dcl2drb4突变体T_1代转基因植物。该结果为研究AtHyl1是否参与DCL4介导的抗病毒RNA沉默通路提供了帮助。
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| 关 键 词： | CRISPR/Cas9 基因编辑 AtHyl1 拟南芥三突变体hyl1dcl2drb4 |
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