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阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶的基因克隆及重组酶性质分析
引用本文:夏立亮,侯巍,王保学,刘华,高伟,蒋琴,李鑫,于源华.阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶的基因克隆及重组酶性质分析[J].中国生物工程杂志,2010,30(5):6-10.
作者姓名:夏立亮  侯巍  王保学  刘华  高伟  蒋琴  李鑫  于源华
作者单位:1.长春理工大学生命科学技术学院 长春 130022 2.中国人民解放军第208医院 长春 130021 3.长春卫尔赛生物药业有限公司 长春 130616
摘    要:为研究重组阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶的活性,从阴道毛滴虫提取RNA,经过RT-PCR克隆蛋氨酸γ-裂解酶基因,与pET-15b质粒连接构建原核表达载体pET-15b-mgl1,并测序。转化宿主菌BL21后进行诱导表达,分离纯化目的蛋白并研究其酶学性质。以L-蛋氨酸、DL-同型半胱氨酸、L-半胱氨酸为底物测定重组酶Km值为0.318、2.14、1.62mmol/L,比活性分别为20.17、318.69、56.96μmol/min/mg protein。MGL最适pH在5.0到6.0之间,在50℃可稳定30min无活性损失。实验结果显示重组酶具有较高的活性和较好的热稳定性,为临床应用研究奠定基础。

关 键 词:L-蛋氨酸γ-裂解酶  抗癌剂  同型半胱氨酸血症  基因克隆  阴道毛滴虫  
收稿时间:2010-01-11
修稿时间:2010-03-01
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