| 家蚕miRNA Novel-31~*上调溶血素基因的表达 |
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| 引用本文： | 施莉莉,耿涛,吴萍,潘中华,覃光星,高坤,侯成香,郭锡杰.家蚕miRNA Novel-31~*上调溶血素基因的表达[J].昆虫学报,2016(7):724-731. |
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| 作者姓名： | 施莉莉 耿涛 吴萍 潘中华 覃光星 高坤 侯成香 郭锡杰 |
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| 作者单位： | 1. 江苏科技大学生物技术学院,江苏镇江,212018;2. 苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州,215123 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划项目(2012CB114605) |
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| 摘 要： | 【目的】Novel-31*是在家蚕质型多角体病毒(Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus,Bm CPV)感染的家蚕中发现的一个差异表达miRNA。本研究旨在验证Novel-31*对其靶基因表达的调控作用,以便进一步研究miRNA及其靶基因在昆虫免疫调节中的作用。【方法】用生物信息学方法预测Novel-31*的靶基因,荧光定量PCR分析Novel-31*及其靶基因在家蚕感染Bm CPV后不同时间点的表达变化;构建miRNA慢病毒表达载体和靶基因慢病毒表达载体,转染293T细胞,同时合成Novel-31*mimics转染家蚕培养细胞Bm N,使用荧光定量PCR检测Novel-31*对靶基因表达的调控作用。【结果】生物信息学方法预测发现,溶血素基因是Novel-31*的靶基因,其结合位点位于溶血素基因的5'UTR区域。荧光定量PCR分析表明,Novel-31*及溶血素基因在感染Bm CPV的家蚕血淋巴细胞中呈现明显的上调表达。荧光定量PCR检测表明,在Novel-31*慢病毒表达载体和溶血素基因5'UTR慢病毒表达载体转染的293T细胞中和在转染Novel-31*mimics的家蚕Bm N细胞中,溶血素基因都上调表达。【结论】溶血素基因是miRNA Novel-31*的靶基因,Novel-31*与溶血素基因5'UTR结合,上调溶血素基因的表达。
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| 关 键 词： | 家蚕 miRNA Novel-31* 靶基因 慢病毒载体 溶血素 |
microRNA Novel-31* up-regulates the expression of hemocytin gene in the silkworm,Bombyx mori |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bombyx mori miRNA Novel-31 * target gene lentiviral expression vector hemocytin |
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