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孟氏隐唇瓢虫气味结合蛋白ComOBP1基因的克隆和时空表达
引用本文:潘畅,张宇宏,谢佳沁,李浩森,庞虹.孟氏隐唇瓢虫气味结合蛋白ComOBP1基因的克隆和时空表达[J].环境昆虫学报,2016(2):249-260.
作者姓名:潘畅  张宇宏  谢佳沁  李浩森  庞虹
作者单位:1. 有害生物控制与资源利用国家重点实验室,生物多样性演化与保护广东普通高校重点实验室,中山大学生命科学学院,广州510275;2. 广东省昆虫研究所,广东省农业害虫综合治理重点实验室,广东省野生动物保护与利用公共实验室,广州510260;3. 有害生物控制与资源利用国家重点实验室,生物多样性演化与保护广东普通高校重点实验室,中山大学生命科学学院,广州510275;根特大学生物工程学院植物保护系,比利时根特市B-9000
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)项目(2013CB127600),国家自然科学基金面上项目(31171899;31572052),国家自然科学基金项目(31301720)
摘    要:采用RT-PCR和RACE技术,从孟氏隐唇瓢虫Cryptolaemus montrouzieri Mulsant中成功克隆出气味结合蛋白(Com OBP1)基因的全序列(Genbank登陆号:KU170686)。Com OBP1基因全长922 bp,包括5'端长为40 bp的非编码区域(UTR),及3'端长为462 bp的UTR,开放阅读框ORF长为420 bp,编码139个氨基酸,预测的分子量为15.516 k Da,等电点p I为6.57,存在AATAAA加尾信号。N-末端疏水区包含由20个氨基酸构成的信号肽,无跨膜结构,有4个保守的半胱氨酸,属于Minus-C OBP,也是在孟氏隐唇瓢虫中发现的第一个Minus-C OBP。氨基酸序列中有且仅有一个N-糖基化位点为62 NLSA,并存在2个潜在的磷酸化位点。与其它昆虫的Minus-C OBPs进行同源性比较并构建系统发育树,发现与同为鞘翅目Coleoptera昆虫的同源性较高。利用Real-time PCR、RT-PCR技术对Cmon OBP1基因在孟氏隐唇瓢虫不同发育阶段,不同组织,不同营养条件及不同食性下的表达水平进行了测定,结果显示,Cmon OBP1基因在整个发育阶段均有表达,雄性成虫期具有最高表达量,且多在成虫的头部及翅部表达。当营养条件发生变化时,表达丰度不会发生变化,当猎物由天然猎物柑橘粉蚧Planococcus citri Risso变成碗豆修尾蚜Megoura japonica Matsumura时,表达量会明显下降。该结果表明,孟氏隐唇瓢虫的不同发育阶段、不同组织及猎物种类会影响Cmon OBP1基因的表达,从而进一步影响其嗅觉行为。同时,Cmon OBP1基因可能在雄虫相关的信息素感受过程中发挥着重要作用。

关 键 词:孟氏隐唇瓢虫  气味结合蛋白  CmonOBP1基因  基因克隆  序列分析  时空表达

Cloning and spatio-temporal expression of the odorant binding protein ComOBP1 gene from Cryptolaemus montrouzieri Mulsant (Coleoptera: Coccinellidae)
PAN Chang,ZHANG Yu-Hong,XIE Jia-Qin,LI Hao-Sen,PANG Hong.Cloning and spatio-temporal expression of the odorant binding protein ComOBP1 gene from Cryptolaemus montrouzieri Mulsant (Coleoptera: Coccinellidae)[J].Journal of Environmental Entomology,2016(2):249-260.
Authors:PAN Chang  ZHANG Yu-Hong  XIE Jia-Qin  LI Hao-Sen  PANG Hong
Institution:(1 State Key Laboratory of Biocontrol, Key Laboratory of Biodiversity Dynamics and Conservation of Guangdong Higher Education Institute, College of Ecology and Evolution, School of Life Sciences, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510275, China; 2 Laboratory of Integrated Pest Management in Agriculture, Guangdong Public Laboratory of Wild Animal Conservation and Utilization, Guangdong Entomological Institute, Guangzhou 510260, China; 3 Department of Crop Protection, Faculty of Bioscience Engineering, Ghent University, Coupure links 653, B 9000 Ghent, Belgium)
Abstract:
Keywords:Cryptolaemus montrouzieri Mulsant  odorant binding protein  CmonOBP1 gene  gene cloning  sequence analysis  spatio-temporal expression
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