ERα与Sp1相互作用激活LRP16启动子转录活性 |
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引用本文: | 赵亚力,韩为东,母义明,李琦,李雪,宋海静,卢学春,于力,陆菊明,潘长玉.ERα与Sp1相互作用激活LRP16启动子转录活性[J].中国生物化学与分子生物学报,2004,20(3):363-369. |
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作者姓名: | 赵亚力 韩为东 母义明 李琦 李雪 宋海静 卢学春 于力 陆菊明 潘长玉 |
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作者单位: | 1. 解放军总医院基础医学研究所分子生物学研究室,北京,100853 2. 解放军总医院内分泌科,北京,100853 3. 解放军总医院血液科,北京,100853 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目资助 (No .3 0 2 0 0 0 95 )~~ |
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摘 要: | 根据已报道的LRP1 6启动子序列 (2 6kb) ,采用PCR反应获得 6个启动子 5′删除突变体 ,分别插入pGL3 Basic载体 ,构建 6种 5′缺失报告基因表达载体 (pS1 ~pS6) .分别与ERα真核表达载体共转染MCF 7细胞 .用双荧光素酶报告系统测定荧光素酶活性 ,以明确LRP1 6基因上游启动子区域中的雌激素反应序列 .结果显示 ,pS1 ~pS6均有雌二醇反应性 .进而对pS5的 3′端缺失分析发现LRP1 6基因翻译起始位点上游 - 2 1 4至 - 2 5 1位置的序列具有雌激素应答 ,序列分析发现该片段序列中包含了一个供转录因子Sp1结合的GC富含位点和一个ERα反应元件的半位点 (1 2ERE Sp1 ) ,进一步突变分析显示这两个元件均为雌激素反应性所必需 .以含这两个顺式元件的序列 (- 2 5 3bp至 - 2 2 4bp)作为探针 ,超级迁移凝胶电泳试验结果表明了ERα和Sp1蛋白均可以和探针结合 .研究发现了雌激素上调LRP1 6基因表达的一个增强子元件— 1 2ERE Sp1 ,ERα和Sp1蛋白需要与DNA结合形成复合体 ,通过其相互作用激活转录
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关 键 词: | 雌激素 雌激素受体α LRP16 Sp1 |
收稿时间: | 2004-06-20 |
修稿时间: | 2003年12月19 |
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