维甲酸受体β基因RNAi表达质粒的构建及其对A549细胞增殖和分化的影响

目的：利用RNA干扰（RNAi）技术，构建针对维甲酸受体（RAR）β基因的小干扰RNA（siRNA）表达质粒，诱导RARβ基因沉默，并观察其对肺癌细胞A549株的细胞周期和增殖的影响。方法：依据设计siRNA的原则。针对人RARβ的mRNA序列，设计并合成编码siRNA的2条寡核苷酸序列，经退火成互补双链，再克隆到pSUPER-NEO-GFP真核表达载体中构建重组体pSUPER-RARβ转染至A549细胞中，以空质粒和RARβ高表达质粒转染为对照，用Western印迹检测RARβ基因的表达，并采用M1Tr试验检测转染后细胞株的增殖和细胞分化情况。结果：表达人类RARβ基因的siRNA重组表达质粒构建成功；MTT试验结果表明，转染的A549-RARβ-si细胞增殖能力降低。结论：采用RNAi技术特异阻断RARB基因表达，通过转染A549细胞，可使其细胞形态发生变化，并抑制其细胞生长。