| 甲状腺转录因子-1融合表达载体的构建及体外活性鉴定 |
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| 引用本文： | 程烽,盛燕,潘春明,陈漪,施静艺,刘智,白雪涛,宋怀东.甲状腺转录因子-1融合表达载体的构建及体外活性鉴定[J].生物技术通讯,2007,18(1):1-4. |
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| 作者姓名： | 程烽 盛燕 潘春明 陈漪 施静艺 刘智 白雪涛 宋怀东 |
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| 作者单位： | 1. 南京军区,福州总医院全军医学检验中心,福建,福州,350025;上海交通大学,附属瑞金医院人类基因组国家重点实验室,上海血液学研究所,上海,200025
2. 上海交通大学,附属瑞金医院人类基因组国家重点实验室,上海血液学研究所,上海,200025 |
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| 摘 要： | 目的:构建人甲状腺转录因子-1(TTF1)编码基因的真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)C-TTF1,并观察其蛋白质体外转录翻译情况。方法:据已知的TTF1基因序列,应用巢式PCR技术,从人肺腺癌细胞株SPC-A1中扩增出TTF1基因,通过TA连接将其克隆入pGEM-T-easy载体,经测序鉴定后,双酶切插入真核表达质粒pcDNA3.1/myc-His(-)C中;重组质粒经XhoⅠ和BamHⅠ双酶切鉴定后,进行蛋白质体外翻译观察TTF1体外表达情况,用电泳迁移率变动分析(EMSA)验证获得的体外翻译蛋白TTF1是否具有与下游靶基因UGRP1启动子结合的能力。结果:成功构建了含TTF1编码基因的真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)C-TTF1,并能在体外表达TTF1蛋白。结论:能方便地获得TTF1体外翻译蛋白,为进一步研究TTF1蛋白与相应的DNA反应元件及其他转录因子的相互作用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 甲状腺转录因子-1 真核表达 转录翻译 电泳迁移率变动分析 |
| 文章编号： | 1009-0002（2007）01-0001-04 |
| 修稿时间： | 2006-06-30 |
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