幼畜腹泻双价基因工程疫苗(K88、K99)的高密度发酵生产工艺及抗原过量表达 |
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引用本文: | 孙玉昆,顾大年,巫爱珍,张文琴,徐安清,蒋浩波,仲毅毅,张志安.幼畜腹泻双价基因工程疫苗(K88、K99)的高密度发酵生产工艺及抗原过量表达[J].生物工程学报,1990,6(2). |
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作者姓名: | 孙玉昆 顾大年 巫爱珍 张文琴 徐安清 蒋浩波 仲毅毅 张志安 |
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作者单位: | 中国科学院上海生物工程中心,上海 |
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摘 要: | 本文报道了幼畜腹泻双价基因工程疫苗(K88、K99)的高密度发酵生产工艺和抗原基因的过量表达研究结果。采用New Biunswick公司发酵罐,主要发酵参数为搅拌速度1000rpm,通气量为18L/min,溶氧为25%,pH6.5,罐压为48.3kPa,温度37℃,发酵时间为20h。菌体浓度为A 6 0 0 nm40以上,K88、K99抗原效价分别达212水平。发酵过程中发现表达的抗原除装配细菌伞毛之外,过量表达的抗原以相当于伞毛中抗原浓度游离存在于溶液中。含双价疫苗基因的表选型质粒的稳定性在发酵20h后保持在70%。本文结果表明利用小型发酵罐(10L发酵液)每次可制备10000支疫苗,完全可以满足对幼畜腹泻基因工程疫苗盼大量需要。
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关 键 词: | K88、K99双价疫苗 高密度发酵 |
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