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枯草芽孢杆菌中一种新型双向启动子的功能鉴定
作者姓名:柴昊男  张会图  袁飞燕  刘焕  路福平
作者单位:天津科技大学 生物工程学院,工业发酵微生物教育部重点实验室,天津 300457,天津科技大学 生物工程学院,工业发酵微生物教育部重点实验室,天津 300457,天津科技大学 生物工程学院,工业发酵微生物教育部重点实验室,天津 300457,天津科技大学 生物工程学院,工业发酵微生物教育部重点实验室,天津 300457,天津科技大学 生物工程学院,工业发酵微生物教育部重点实验室,天津 300457
基金项目:国家重点研发计划 (No. 2017YFB0308401) 资助。
摘    要:本研究旨在通过转录组分析预测的方法,由地衣芽孢杆菌中筛选获得一种新型双向启动子,鉴定其启动强度。以已知强组成型启动子pShuttle-09为对照,检测其对克劳氏芽孢杆菌碱性蛋白酶基因的表达活性。成功构建了3种重组碱性蛋白酶表达载体及对应的工程菌株。在新型启动子pLA和其反向启动子pLB调控转录下,克劳氏芽孢杆菌碱性蛋白酶表达活性达到164 U/mL和111 U/mL。结果表明,pLA的启动强度明显高于pShuttle-09和pLB,pLA启动子与pLB启动子均可表达碱性蛋白酶。从而为枯草芽孢杆菌表达系统中异源基因的表达提供一个新的方向,也为原核生物中共同表达两种基因提供了新的思路。

关 键 词:双向启动子  芽孢杆菌  碱性蛋白酶
收稿时间:2019-01-15
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