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不同酿酒酵母菌株来源异麦芽糖酶IMA1的克隆、表达及表征
引用本文:叶进前,赵勇山,杜昱光,李建军.不同酿酒酵母菌株来源异麦芽糖酶IMA1的克隆、表达及表征[J].微生物学报,2019,59(7):1354-1362.
作者姓名:叶进前  赵勇山  杜昱光  李建军
作者单位:沈阳药科大学生命科学与生物制药学院, 辽宁 沈阳 110016,沈阳药科大学生命科学与生物制药学院, 辽宁 沈阳 110016,中国科学院过程工程研究所, 生化工程国家重点实验室, 国家生物技术工程研究中心(北京)全军生物药制造和剂型工程重点实验室, 北京 100190,中国科学院过程工程研究所, 生化工程国家重点实验室, 国家生物技术工程研究中心(北京)全军生物药制造和剂型工程重点实验室, 北京 100190
基金项目:国家自然科学基金(31370799)
摘    要:目的]异麦芽糖酶IMA1在充分利用含有α-1,6-O-糖苷键的低聚糖中起着关键作用。方法]在本研究中,对来自4株酿酒酵母菌株(包括3株嗜酸性菌株)来源的异麦芽糖酶IMA1进行克隆、表达、纯化和表征。结果]研究发现,4种异麦芽糖酶IMA1表现出类似的pH和温度依赖性,但表现出不同的动力学参数和热稳定性。IMA1-A对α-MG(α-甲基葡糖苷)表现出最高的结合亲和力、转换数、催化效率和热稳定性。结构和序列分析表明,2个远离活性位点和底物结合位点的氨基酸的差异对异麦芽糖酶IMA1的动力学参数和热稳定性有重要影响。结论]本研究结果对进一步研究异麦芽糖酶IMA1的结构-功能关系奠定了基础。

关 键 词:异麦芽糖酶IMA1  酿酒酵母  动力学参数  pH值-活性曲线  热稳定性
收稿时间:2018/9/20 0:00:00
修稿时间:2018/11/28 0:00:00

Cloning, overexpression and characterization of isomaltases IMA1 from different strains of Saccharomyces cerevisiae
Jinqian Ye,Yongshan Zhao,Yuguang Du and Jianjun Li.Cloning, overexpression and characterization of isomaltases IMA1 from different strains of Saccharomyces cerevisiae[J].Acta Microbiologica Sinica,2019,59(7):1354-1362.
Authors:Jinqian Ye  Yongshan Zhao  Yuguang Du and Jianjun Li
Institution:School of Life Science and Bio-Pharmaceutics, Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110016, Liaoning Province, China,School of Life Science and Bio-Pharmaceutics, Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110016, Liaoning Province, China,National Key Laboratory of Biochemical Engineering, National Engineering Research Center for Biotechnology(Beijing), Key Laboratory of Biopharmaceutical Production & Formulation Engineering, PLA, Institute of Process Engineering, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100190, China and National Key Laboratory of Biochemical Engineering, National Engineering Research Center for Biotechnology(Beijing), Key Laboratory of Biopharmaceutical Production & Formulation Engineering, PLA, Institute of Process Engineering, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100190, China
Abstract:
Keywords:isomaltase IMA1  Saccharomyces cerevisiae  kinetic parameters  pH-rate profile  thermostability
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