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辣根过氧化物酶同工酶C基因在巴斯德毕赤酵母中的克隆与鉴定
作者姓名:邵金辉  朱有名  韩金祥
作者单位:山东省医药生物技术研究中心,国家卫生部生物技术药物重点实验室,山东,济南,250062
基金项目:山东省自然基金资助课题(编号:Y2004C33)
摘    要:目的:克隆辣根过氧化物酶同工酶C基因,为此基因的表达作准备。方法:用PCR方法从辣根的总DNA中扩增得到一种辣根过氧化物酶同工酶C基因HRPC2,通过PCR的方法去除内含子后连接到pMD18-T载体上,测序证明正确后,用限制性内切酶切下目的基因,插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建成重组质粒pC2EX9K。再将辣根过氧化物酶同工酶C基因在毕赤酵母中进行克隆、鉴定。结果:重组质粒pC2EX9K转化毕赤酵母后,经PCR鉴定,证明形成了目的基因的克隆。结论:应用毕赤酵母作为受体菌,pPIC9K为载体,成功克隆了HRPC2。

关 键 词:辣根过氧化物酶 基因 聚合酶链反应 克隆 巴斯德毕赤酵母
文章编号:1004-311X(2005)03-0001-04
修稿时间:2004-12-19
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