辣根过氧化物酶同工酶C基因在巴斯德毕赤酵母中的克隆与鉴定 |
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作者姓名: | 邵金辉 朱有名 韩金祥 |
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作者单位: | 山东省医药生物技术研究中心,国家卫生部生物技术药物重点实验室,山东,济南,250062 |
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基金项目: | 山东省自然基金资助课题(编号:Y2004C33) |
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摘 要: | 目的:克隆辣根过氧化物酶同工酶C基因,为此基因的表达作准备。方法:用PCR方法从辣根的总DNA中扩增得到一种辣根过氧化物酶同工酶C基因HRPC2,通过PCR的方法去除内含子后连接到pMD18-T载体上,测序证明正确后,用限制性内切酶切下目的基因,插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建成重组质粒pC2EX9K。再将辣根过氧化物酶同工酶C基因在毕赤酵母中进行克隆、鉴定。结果:重组质粒pC2EX9K转化毕赤酵母后,经PCR鉴定,证明形成了目的基因的克隆。结论:应用毕赤酵母作为受体菌,pPIC9K为载体,成功克隆了HRPC2。
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关 键 词: | 辣根过氧化物酶 基因 聚合酶链反应 克隆 巴斯德毕赤酵母 |
文章编号: | 1004-311X(2005)03-0001-04 |
修稿时间: | 2004-12-19 |
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