| 干扰素-β1b的高效表达、纯化及抗病毒活性研究 |
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| 引用本文： | 李武平,吕宏亮,段招军,张丽萍,刘永清,吴斌文,陈勇,张成海,衣作安,魏开坤,侯云德.干扰素-β1b的高效表达、纯化及抗病毒活性研究[J].病毒学报,2002,18(3):240-244. |
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| 作者姓名： | 李武平 吕宏亮 段招军 张丽萍 刘永清 吴斌文 陈勇 张成海 衣作安 魏开坤 侯云德 |
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| 作者单位： | 中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,病毒基因工程国家重点实验室,北京,100052 |
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| 摘 要： | IFN-β1b是大肠杆菌产生的17位Cys被Ser替换的人IFN-β的类似物,为了获得高表达,使用了大肠杆菌的偏爱密码子,人工合成了IFN-β-1b基因,插入质粒pBV220中,转化大肠杆菌DH5α.IFN-β1b的制备过程,包括发酵和一系列的纯化步骤.经修饰,IFN-β1b基因在启动子PRPL控制下发酵表达,合成的蛋白质以包涵体的形式存在.培养的细菌经收集、裂解后,将包涵体释放出来,包涵体经含SDS的溶液溶解,DTT还原.纯化过程包括有机溶剂抽提、分子筛层析、脱盐、氧化复性和反相层析,并用旋转蒸发除去有机溶剂.IFN-β-1b在不同种系来源的细胞上显示不同的抗病毒活性.
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| 关 键 词： | 干扰素 表达 纯化 反相高效层析(HPLC) |
| 文章编号： | 1000-8721(2002)03-0240-05 |
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