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miR-181b-5p 对于卡波西肉瘤细胞SLK细胞增殖和凋亡的影响
引用本文:丁媛,吴秀娟,向芳,康晓静,于世荣,冯燕艳,王红娟,普雄明.miR-181b-5p 对于卡波西肉瘤细胞SLK细胞增殖和凋亡的影响[J].现代生物医学进展,2015,15(21):4005-4008.
作者姓名:丁媛  吴秀娟  向芳  康晓静  于世荣  冯燕艳  王红娟  普雄明
作者单位:新疆医科大学;新疆维吾尔自治区人民医院皮肤性病科
基金项目:国家自然科学基金地区科学基金项目(81260311);新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(2014211A059)
摘    要:目的:探讨Dppa2 基因5'' 端启动子区Oct4 结合位点突变对Dppa2基因启动子活性的影响。方法:PCR 扩增包括Oct4 结合 位点的Dppa2 基因5'' 端转录起始点上游-2439~+293 bp 的启动子序列,片段长度为2732 bp。将该片段连接到pGL3-Basic 载体, 构建野生型pGL3-2439表达载体。采用定点突变法,将-1959~-1957 位碱基的GCA突变成TAG,构建Oct4 结合位点突变型 pGL3-mo2439 表达载体。用上述两种表达载体、PGL3-basic 载体和Oct4 表达载体分别瞬时转染HEK 293 细胞。细胞培养48 h 后,利用双荧光素酶报告系统测定各组细胞表达的荧光素酶的相对活性。结果:经琼脂糖凝胶电泳及测序鉴定,证实野生型 (pGL3-2439)和突变型(pGL3-mo2439)载体构建成功。荧光素酶活性测定结果显示,转染Dapp2 基因启动子野生型pGL3-2439 表 达载体的细胞组荧光素酶的相对活性为16.307,突变型pGL3-mo2439 表达载体的细胞组荧光素酶的相对活性为10.634。Oct4 结 合位点突变后,Dppa2 基因启动子区转录活性较野生型降低了35 %。结论:Dppa2基因5''端启动子区-1959~-1957 位的Oct4 结 合位点突变可能导致Dppa2 基因启动子活性下降。

关 键 词:miR-181b-5p  卡波氏肉瘤  增殖  凋亡

The Effects of MicroRNA-181b-5p on Proliferation and Apoptosis of Human Kaposi's Sarcoma Cell Line SLK
Abstract:
Keywords:miR-181b-5p  Kaposi''s sarcoma  Proliferation  Apoptosis
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