| 可视化突变建模、定点突变和表达超耐热菌D-乳酸脱氢酶 |
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| 作者姓名： | 田晋红 刘琦 战丽萍 周泽扬 |
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| 作者单位： | 1. 西南大学蚕学与系统生物学研究所 重庆 400716;2. 西南大学药学院 重庆 400716;3. 重庆市兽药工程技术研究中心 重庆 400716;4. 重庆师范大学生命科学学院 重庆 400047 |
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| 基金项目： | 重庆市科技创新能力建设（CSTC，2009CB1010）资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建产天然防腐剂苯乳酸的工程菌。方法 分析超耐热菌（Aquifex aeolicus，A.aeolicus ）D-乳酸脱氢酶（D-LDH）的三维构象，并与构建的可视化突变体三维模型进行对比，通过比较酶活性中心氨基酸残基与底物的空间构象，优选最佳模型进行定点突变，克隆、表达和苯乳酸发酵实验。结果 优选到F49A和Y297S两个单突变模型和一个F49A/Y297S双突变模型；分别进行定点突变和工程菌构建，三个突变工程菌，均能发酵产生苯乳酸。结论 可视化定点突变乳酸脱氢酶可作为构建高产苯乳酸工程菌的有效方法。
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| 关 键 词： | 可视化 突变 苯乳酸 乳酸脱氢酶 |
| 收稿时间： | 2012-01-31 |
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