| 棉花GhCOMT1基因原核表达载体构建及蛋白纯化和Western鉴定 |
| |
| 引用本文： | 李 波,倪志勇,李晓东,范 玲.棉花GhCOMT1基因原核表达载体构建及蛋白纯化和Western鉴定[J].西北植物学报,2012,32(10):1971-1976. |
| |
| 作者姓名： | 李 波 倪志勇 李晓东 范 玲 |
| |
| 作者单位： | 新疆农业科学院核技术生物技术研究所,乌鲁木齐,830091 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金-新疆联合基金项目（U1178305）；新疆自治区高技术研究发展计划项目（201111116）；国家自然科学基金项目（31060173） |
| |
| 摘 要： | 为进一步研究GhCOMT1基因的功能,构建了原核表达载体pET-28a-GhCOMT1,酶切鉴定并测序后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,在0.2mmol/L IPTG浓度条件下分别进行不同温度梯度诱导,用蛋白标记亲和层析柱(His TrapTM HP)对重组蛋白进行纯化,并用SDS-PAGE和Western blotting方法鉴定表达产物。结果表明:16℃诱导12h、30℃诱导3h和37℃诱导3h后融合蛋白均以包涵体的形式表达,其中16℃诱导12h的蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测目的蛋白相对分子量约为39.748kD;Western blotting分析表明,目的蛋白能与His多克隆抗体起特异性反应。
|
| 关 键 词： | GhCOMT1 原核表达 蛋白纯化 Western blotting |
Construction of Prokaryotic Expression Vector,Protein Purification and Identification of GhCOMT1 Gene from Gossypium hirsutum L. |
| |
| LI Bo,NI Zhi-yong,LI Xiao-dong,FAN Ling.Construction of Prokaryotic Expression Vector,Protein Purification and Identification of GhCOMT1 Gene from Gossypium hirsutum L.[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2012,32(10):1971-1976. |
| |
| Authors: | LI Bo NI Zhi-yong LI Xiao-dong FAN Ling |
| |
| Institution: | (Institute of Nuclear and Biological Technologies,Xinjiang Academy of Agricultural Sciences,Urumqi,830091,China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《西北植物学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《西北植物学报》下载免费的PDF全文 |
|
