无载体主干序列的bar和cecropin B 基因表达框共转化水稻 |
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引用本文: | 赵艳,于彦春,钱前,颜美仙,黄大年.无载体主干序列的bar和cecropin B 基因表达框共转化水稻[J].遗传学报,2003,30(2):135-141. |
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作者姓名: | 赵艳 于彦春 钱前 颜美仙 黄大年 |
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作者单位: | 1. 浙江大学生命科学学院,杭州,310029;杭州产学院生物工程系,杭州,310035;中国水稻研究所生物工程系农业部水稻生物学重点实验室,杭州,310006 2. 浙江大学生命科学学院,杭州,310029;中国水稻研究所生物工程系农业部水稻生物学重点实验室,杭州,310006 3. 中国水稻研究所生物工程系农业部水稻生物学重点实验室,杭州,310006 |
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基金项目: | 国家自然科学基金 (批准号 :3 9970 4713 9970 40 9),浙江省自然科学基金(批准号 :3 0 0 2 2 0 ),农业部水稻生物学重点实验室开放项目~~ |
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摘 要: | 基因枪等直接转化法可将去除质粒载体主干序列的外源基因表达框导入植物基因组,消除质粒主干序列对植物基因组的影响,同时由于转基因分子较小,比较容易实现多个基因的共转化,在植物基因工程育种上有重要的应用价值,研究了基因枪介导外源基因表达框(包括启动子、基因开放阅读框和终止子)转化水稻的影响因素和转基因的整合模式,结果表明:(1)基因枪介导外源基因表达框转化水稻的频率约在0.1%~0.5%之间,非选择标准基因与选择标记基因的共转化频率约为50%~60%,增加基因表达框DNA浓度可提高转化率。相同基因构建物对不同品质水稻的转化率不同,基因构建物的侧边序列对基因枪转化的品种差异可能具有重要影响。(2)非选择标记基因cecropin B表达框在水稻基因组内整合模式简单,仅有1~3个拷贝;筛选标记基因bar表达框却比完整质粒转化后的整合模式复杂得多,插入拷贝数在4~14个之间,线形基因表达框的游离DNA末端和CaMV 35S启动中子重组热点介导的转基因重组可能是导致bar基因表达框复杂整合的重要原因。
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关 键 词: | 无载体主干序列 bar cecropin B基因 表达框 共转化 水稻 |
文章编号: | 0379-4172(2003)02-0135-07 |
修稿时间: | 2002年7月22日 |
Cotransformation of Rice by bar and cecropin B Gene Expression Cassettes Lacking Vector Backbone Sequences |
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Abstract: | |
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Keywords: | gene expression cassettes rice(Oryza sativa L ) transformation integration |
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