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8-异戊烯基柑橘素促进体外培养成骨细胞成熟矿化的研究
引用本文:明磊国,陈克明,葛宝丰,翟远坤.8-异戊烯基柑橘素促进体外培养成骨细胞成熟矿化的研究[J].生物化学与生物物理进展,2011,38(5):433-440.
作者姓名:明磊国  陈克明  葛宝丰  翟远坤
作者单位:兰州军区兰州总医院骨科研究所,兰州 730050;兰州军区兰州总医院骨科研究所,兰州 730050;兰州军区兰州总医院骨科研究所,兰州 730050;兰州军区兰州总医院骨科研究所,兰州 730050
基金项目:甘肃省科技重大专项计划资助项目(092nkDA025)
摘    要:研究8-异戊烯基柑橘素对体外培养大鼠颅骨成骨细胞(rat skull osteoblasts,ROB)的分化成熟及生物矿化的影响.取新生大鼠颅骨多次酶消化法得到成骨细胞,培养于含10%FBS的MEM培养液中,3天后首次换液,待细胞铺满皿底传代培养.以碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)为检测指标,96孔板梯度筛选作用最佳浓度,在最佳浓度作用并成骨性诱导培养的第3、6、9、12天测ALP活性、钙盐沉积量;第12天进行ALP和钙化结节组织化学染色及计数;成骨性诱导后不同时间点提取Total RNA,RT real-time PCR法检测成纤维细胞生长因子(bFGF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、成骨相关转录因子Osterix、Runx-2和骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的基因表达情况;成骨性诱导的第4、8、12天裂解获得细胞总蛋白,蛋白质印迹法检测人Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)的蛋白质表达量.研究结果表明:1×10-6 mol/L能显著促进成骨细胞的成熟分化,表现为提高ROB的ALP活性、促进钙盐沉积、增加钙化结节数量;提高bFGF、IGF-1、Osterix、Runx-2和BMP-2 mRNA表达水平;促进COL-Ⅰ的合成.由此可知终浓度为1×10-6 mol/L 8-异戊烯基柑橘素能显著促进ROB的分化成熟及生物矿化,证明8-异戊烯基柑橘素能促进成骨细胞的分化成熟及生物矿化,作为促进骨修复和抗骨质疏松的有效成分具有较大的药用价值.

关 键 词:骨质疏松  成骨细胞  分化  增殖  8-异戊烯基柑橘素  矿化
收稿时间:2010/9/26 0:00:00
修稿时间:2011/2/25 0:00:00

Effects of 8-Prenylnaringenin on Osteoblasts Differentiate and Biomineralization in vitro
MING Lei-Guo,CHEN Ke-Ming,GE Bao-Feng and ZHAI Yuan-Kun.Effects of 8-Prenylnaringenin on Osteoblasts Differentiate and Biomineralization in vitro[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2011,38(5):433-440.
Authors:MING Lei-Guo  CHEN Ke-Ming  GE Bao-Feng and ZHAI Yuan-Kun
Institution:Institute of Orthopaedics, Lanzhou General Hospital, Lanzhou 730050;Institute of Orthopaedics, Lanzhou General Hospital, Lanzhou 730050;Institute of Orthopaedics, Lanzhou General Hospital, Lanzhou 730050;Institute of Orthopaedics, Lanzhou General Hospital, Lanzhou 730050
Abstract:
Keywords:osteoporosis  osteoblasts  differentiation  proliferation  mineralization  8-prenylnaringenin
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