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糖蛋白G 基因在基因组P-M 位的插入重组表达对狂犬病毒Flury LEP 致病力的影响
引用本文:翟洪月,陶丽红,葛金英,王喜军,冯娜,帅磊,马良,步志高.糖蛋白G 基因在基因组P-M 位的插入重组表达对狂犬病毒Flury LEP 致病力的影响[J].微生物学报,2011,51(8):1098-1105.
作者姓名:翟洪月  陶丽红  葛金英  王喜军  冯娜  帅磊  马良  步志高
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室,哈尔滨150001
2. 军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130122
3. 东北农业大学动物医学学院,哈尔滨,150030
基金项目:国家科技重大专项(2009ZX10004-214)
摘    要:【目的】研究狂犬病病毒Flury鸡胚低代毒株(Flury LEP)在基因组P-M位增加糖蛋白基因(G基因)的重组表达对病毒致病力的影响。【方法】利用反向遗传操作技术,构建了P、M基因之间额外插入G基因的重组狂犬病病毒Flury LEP株(rLEP-PGM),并对重组病毒的生物学特性及对小鼠的致病性进行了初步研究。【结果】亲本株和重组病毒具有相似的生长特性,LEP和rLEP-PGM在BHK-21细胞的生长滴度分别为4×106 FFU/mL和2.5×106 FFU/mL,在小鼠神经母细胞(NA)的生长滴度分别为4×107 FFU/mL和2.5×107 FFU/mL;嗜神经指数均为1;Western blot显示,rLEP-PGM在感染细胞的G蛋白表达量比LEP显著提高;小鼠感染试验显示,rLEP-PGM与LEP脑内注射小鼠的LD50分别为3 FFU和1 FFU,肌肉注射途径的LD50分别为4×104 FFU和3.2×105 FFU。【结论】P、M基因之间插入一个额外的G基因能够提高G蛋白的表达水平,同时增强重组病毒外周侵入中枢神经系统的能力。

关 键 词:反向遗传技术  狂犬病毒重组表达  糖蛋白  致病性
收稿时间:2011/2/26 0:00:00
修稿时间:2011/4/15 0:00:00

Insertion of glycoprotein gene between P and M gene influences the pathogenicity of the rabies virus Flury LEP
Hongyue Zhai,Lihong Tao,Jinying Ge,Xijun Wang,Na Feng,Lei Shuai,Liang Ma and Zhigao Bu.Insertion of glycoprotein gene between P and M gene influences the pathogenicity of the rabies virus Flury LEP[J].Acta Microbiologica Sinica,2011,51(8):1098-1105.
Authors:Hongyue Zhai  Lihong Tao  Jinying Ge  Xijun Wang  Na Feng  Lei Shuai  Liang Ma and Zhigao Bu
Institution:Hongyue Zhai1,Lihong Tao1,Jinying Ge1,Xijun Wang1,Na Feng2,Lei Shuai1,Liang Ma3,Zhigao Bu1* 1Veterinary Public Health Laboratory of Ministry of Agriculture and State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin Veterinary Research Institute of Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150001,China 2Institute of Military Veterinary,Academy of Military Medical Sciences,Changchun 130122,China 3School of Veterinary Medicine,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China
Abstract:Objective] To study the biological characteristics and pathogenicity of a recombinant rabies virus Flury LEP(low egg passage) that has two glycoprotein genes(G gene).Methods] By using reverse genetics techniques,we constructed a recombinant virus Flury LEP that has an additional G gene between P and M gene(rLEP-PGM).Then we studied the biological characteristics of the recombinant virus and its pathogenicity on mice.Results] The in vitro growth characteristic of rLEP-PGM were similar to the LEP strain.We...
Keywords:Reverse genetics technique  Recombinant rabies virus  Glycoprotein  Pathogenicity  
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