人可溶性低密度脂蛋白受体在甲醇酵母中的表达 |
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作者姓名: | 胡箭 李元 |
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作者单位: | 中国医学科学院、中国协和医科大学医药生物技术研究所,北京,100050 |
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摘 要: | 为获得低密度脂蛋白受体配基结合结构域在甲醇酵母中的分泌表达 ,首先用RT PCR方法以人肝癌Bel 740 2总RNA为模板扩增了编码低密度脂蛋白受体配基结合结构域的基因片段。核酸测序分析表明克隆到的DNA片段的序列与报道的人LDLR的cDNA序列相同。然后构建了甲醇酵母表达质粒pPIC9K sLDLr ,并将其线性化后用电穿孔法导入PichiapastorisGS115。分别用SDS PAGE、Westernblot和Ligandbindingblot对GS115 pPIC9K sLDLr上清中的重组sLDLR进行鉴定。SDS PAGE和Westernblot分析表明表达的sLDLR的表观分子量为 36kD。Ligandbindingblot分析表明表达的sLDLR具有配基结合的生物学活性
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关 键 词: | 低密度脂蛋白受体 Pichia pastoris 分泌表达 |
文章编号: | 1000-3061(2002)01-0040-05 |
修稿时间: | 2001-07-20 |
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