表达猪细小病毒VP2蛋白的重组猪伪狂犬病毒在小鼠体内的免疫反应 |
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引用本文: | 付朋飞,潘鑫龙,乔涵,杨兴武,朱前磊,郭晓庆,张宇,陈红英.表达猪细小病毒VP2蛋白的重组猪伪狂犬病毒在小鼠体内的免疫反应[J].病毒学报,2016,32(2). |
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作者姓名: | 付朋飞 潘鑫龙 乔涵 杨兴武 朱前磊 郭晓庆 张宇 陈红英 |
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作者单位: | 河南农业大学牧医工程学院,郑州450002;大北农动物医学研究中心,北京100195;河南农业大学牧医工程学院,郑州,450002;河南省动物疫病预防控制中心,郑州,450008;河南农业大学牧医工程学院,郑州450002;郑州市猪重大疫病防控重点实验室,郑州450002 |
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基金项目: | 国家科技重大专项;河南省产学研合作项目 |
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摘 要: | 为了研制出能够同时预防猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)和猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)的二联活疫苗,本研究将PPV VP2基因克隆到伪狂犬病毒通用转移质粒pG中,构建重组伪狂犬转移质粒pGVP2。利用脂质体转染法将重组质粒pGVP2和PRV HB98弱毒株DNA共转染至猪睾丸(ST)细胞,使其在ST细胞内发生同源重组,经5次绿色荧光空斑纯化重组病毒rPRV-VP2。分别用重组病毒rPRV-VP2、亲本PRV HB98弱毒株、商品化PPV灭活苗和DMEM细胞培养液免疫6周龄雌性昆明小鼠,2周后进行二免。一免后第7周用PRV强毒NY株对小鼠进行攻毒。结果获得表达VP2基因的重组病毒rPRV-VP2,经ELISA试验、血清中和试验(SN)、血凝抑制试验(HI)和流式细胞检测发现,重组病毒rPRV-VP2株可有效刺激小鼠机体产生抗PPV和PRV抗体,同时具有增强小鼠机体细胞免疫反应的能力,且对PRV强毒攻击具有保护作用。结果表明,重组病毒rPRV-VP2可作为同时预防PPV和PRV感染的重组疫苗候选株。
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关 键 词: | 猪细小病毒 猪伪狂犬病毒 VP2蛋白 重组病毒 免疫效力 |
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