小鼠胚胎干细胞p16^INK4a基因外显子1a打靶研究 |
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引用本文: | 龚振明 李坚 等. 小鼠胚胎干细胞p16^INK4a基因外显子1a打靶研究[J]. 遗传学报, 2002, 29(1): 21-25 |
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作者姓名: | 龚振明 李坚 等 |
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作者单位: | [1]第二军医大学医学遗传教研室,上海200433 [2]上海交通大学动物科学系,上海201101 |
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基金项目: | 国家自然科学基金重点项目(39830360);上海联合利华科技和发展基金(9808)[Supportedby The National Natural Science Foundation of China (Proj. No. 39830360) andShanghai-Unilever Research and Development Fund (Proj. No. 9808)] |
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摘 要: | 在活体水平上,小鼠p16^INK4a基因是否具有抑制肿瘤发生和发展的功能是一个悬而未决的问题。利用筛选基因组文库得到的小鼠p16^INK4a基因组DNA片段,构建了针对小鼠p16^INK4a基因外显子1a的基因打靶载体,其短臂为1.5kbEco81 I/AccⅡ片段,长壁为5.9kb Xba I/Xho I片段。打靶载体经线性化和纯化后通过电穿孔转导小鼠R1 ES细胞,获得37个G418和Gancyclovir双药抗性克隆。用Southern杂交法对双药抗性克隆进行鉴定,获得一个敲除了p16^INK4a基因外显子1a的阳性ES细胞克隆。
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关 键 词: | p16^INK4a 基因打靶 小鼠 胚胎干细胞 外显子1a |
文章编号: | 0379-4172(2002)01-0021-05 |
修稿时间: | 2001-07-24 |
p16INK4a Exon 1 |
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Abstract: |
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