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| 小鼠金属硫蛋白ⅠcDNA编码序列的克隆及其在昆虫细胞中的表达 | |
| 引用本文： | 殷慎敏,时晓冰.小鼠金属硫蛋白ⅠcDNA编码序列的克隆及其在昆虫细胞中的表达[J].生物化学杂志,1997,13(4):444-448. |
| 作者姓名： | 殷慎敏 时晓冰 |
| 作者单位： | 北京大学生命科学学院生物化学及分子生物学系 |
| 摘 要： | 将质粒ＰＢＸ－ＭＴ上的小鼠ＭＴ－ⅠｃＤＮＡ片段切下作为模板，通过ＰＣＲ方法删除该片段的非编码序列，将编码序列克隆到质粒ＰＢＳ－ＳＫ中，经ＤＮＡ序列测定后证明其克隆序列正确，再将ＭＴ－ⅠｃＤＮＡ编码序列插入到转移载体ｐＢａｃＰＡＫ８的ＢａｍＨⅠ和ＥｃｏＲⅠ位点之间，通过磷酸钙／ＤＮＡ共转染方法将其导入昆虫细胞Ｓｆ９中，以Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ和ＤｏｔＥＩＡ方法对表达产物进行了检测，表达量为１ｍｇ＝ |
| 关 键 词： | 金属硫蛋白 cDNA 编码序列 克隆 表达 |
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