| 人工microRNAs对拟南芥At1g13770和At2g23470基因的特异沉默 |
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| 作者姓名： | Li WC Zhao SQ |
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| 作者单位： | 山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室 |
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| 基金项目： | 山西省国际科技合作计划(编号:2009081005);山西省留学人员科技活动项目择优资助项目;山西省回国留学人员科研资助项目(编号:201003);太原市科技明星专项(编号:11014902)资助 |
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| 摘 要： | DUF647(Domain of unknown function 647)蛋白家族是在真核生物中广泛存在的、高度保守的蛋白家族。拟南芥中该基因家族共有6个成员,迄今为止拟南芥DUF647家族中4个成员的功能尚不清楚。文章以拟南芥内源MIR319a前体为骨架,构建了敲减DUF647家族中2个基因At1g13770和At2g23470表达的人工microRNAs(Artifical microRNAs,amiRNAs)。利用WMD(Web microRNA designer)平台设计分别靶向At1g13770和At2g23470基因的amiRNAs序列,通过重叠PCR置换拟南芥MIR319a前体序列。构建融合amiRNAs前体的植物表达载体pCHF3-amiRNAs,在农杆菌介导下转化拟南芥。RT-PCR分析表明,amiRNAs能够显著抑制At1g13770和At2g23470基因的表达,获得了抑制效果明显的转基因株系。At2g23470-amiRNA转基因植株At2g23470转录水平的下调导致育性严重下降。文章为进一步研究这两个基因的功能奠定了良好的基础。
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| 关 键 词： | 拟南芥 DUF647基因家族 人工microRNA 基因沉默 |
Specific gene silencing of At1g13770 and At2g23470 by artificial mi-croRNAs in Arabidopsis |
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| Li WC,Zhao SQ.Specific gene silencing of At1g13770 and At2g23470 by artificial mi-croRNAs in Arabidopsis[J].Hereditas,2012,34(3):348-355. |
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| Authors: | Li Wen-Chao Zhao Shu-Qing |
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| Institution: | Key Laboratory of Chemical Biology and Molecular Engineering of Ministry of Education, Institute of Biotechnology, Shanxi University, Taiyuan 030006, China. lwch.001@163.com |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Arabidopsis DUF647 gene family artificial microRNAs gene silencing |
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