核桃JrGRAS2基因响应热胁迫的表达及功能分析

GRAS转录因子在植物响应逆境中起重要作用。为更好的了解核桃(Juglans regia)在逆境胁迫下的适应机制,本研究从‘香玲’核桃转录组中克隆获得一条GRAS基因(命名为Jr GRAS2),对其在不同高温胁迫下的表达进行分析,并将该基因插入酵母表达载体p YES2中构建重组载体p YES2-Jr GRAS2,将p YES2-Jr GRAS2转入酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)INVSCI,同时以转化p YES2的重组酵母作为阴性对照,在酵母表达系统中研究该基因的抗热胁迫功能。结果显示,该基因开放读码框(ORF)全长1 296 bp,拟推导的蛋白分子量为47 405.83 Da,含有氨基酸数为431,理论等电点为5.66。在热胁迫下,Jr GRAS2基因被显著诱导,特别是在36℃胁迫0.5 h的茎内,其表达相对于对照被上调了335.5倍。对两种酵母进行热胁迫,发现转Jr GRAS2基因酵母表现出较对照更高的生存活性。表明Jr GRAS2基因具有响应热胁迫的能力,且能提高酵母的抗性,Jr GRAS2基因可作为核桃逆境应答的重要候选基因。