| 绿盲蝽表皮蛋白基因AlCP17的克隆、多克隆抗体制备及表达谱分析 |
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| 引用本文： | 谭永安,张杰钰,姜义平,赵静,肖留斌,戈林泉.绿盲蝽表皮蛋白基因AlCP17的克隆、多克隆抗体制备及表达谱分析[J].昆虫学报,2023,66(1):37-44. |
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| 作者姓名： | 谭永安 张杰钰 姜义平 赵静 肖留斌 戈林泉 |
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| 作者单位： | (1. 江苏省农业科学院植物保护研究所, 南京 210014; 2. 扬州大学园艺与植物保护学院, 扬州 225009) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31301668)； |
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| 摘 要： | 【目的】本研究旨在通过克隆绿盲蝽Apolygus lucorum表皮蛋白(cuticular protein, CP)基因AlCP17、制备其多克隆抗体和分析其时空表达特性，为AlCP17蛋白功能的研究奠定基础，也为进一步解析绿盲蝽表皮发育过程中的信号通路图谱提供依据。【方法】基于前期转录组数据克隆绿盲蝽AlCP17的cDNA全长序列并进行生物信息学分析；构建AlCP17原核表达载体pCZN1-AlCP17并转化大肠杆菌Escherichia coli进行体外表达，利用纯化后的重组蛋白制备AlCP17蛋白多克隆抗体；qRT-PCR检测AlCP17在绿盲蝽不同发育阶段(1-5龄若虫和成虫)和3龄初期若虫不同组织(头、胸、足、中肠、脂肪体和表皮)中的表达谱。【结果】克隆获得绿盲蝽AlCP17全长cDNA序列(GenBank登录号：OM302231),其开放阅读框长594 bp,编码197个氨基酸，预测蛋白分子量为21.69 kD,理论等电点为6.11。编码的蛋白质具有典型的表皮蛋白结构特征，含有节肢动物表皮蛋白几丁质保守结合域(non-cysCBD),即Chitin＿bind＿4结构域；氨...
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| 关 键 词： | 绿盲蝽 表皮蛋白 RACE 原核表达 多克隆抗体 |
Cloning,polyclonal antibody preparation and expression profiling of cuticular protein geneAlCP17 fromApolygus lucorum(Hemiptera: Miridae) |
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| TAN Yong-An,ZHANG Jie-Yu,JIANG Yi-Ping,ZHAO Jing,XIAO Liu-Bin,GE Lin-Quan.Cloning,polyclonal antibody preparation and expression profiling of cuticular protein geneAlCP17 fromApolygus lucorum(Hemiptera: Miridae)[J].Acta Entomologica Sinica,2023,66(1):37-44. |
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| Authors: | TAN Yong-An ZHANG Jie-Yu JIANG Yi-Ping ZHAO Jing XIAO Liu-Bin GE Lin-Quan |
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| Institution: | (1. Institute of Plant Protection, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China; 2. School of Horticulture and Plant Protection, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China) |
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| Abstract: | |
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