中国人促红细胞生成素cDNA的克隆及其在COS-7细胞中的表达 |
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引用本文: | 韩峰,吴淑华,薛水星,黄利文,马学军.中国人促红细胞生成素cDNA的克隆及其在COS-7细胞中的表达[J].生物工程学报,1996,12(4). |
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作者姓名: | 韩峰 吴淑华 薛水星 黄利文 马学军 |
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作者单位: | 中国预预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室 北京 100052 |
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摘 要: | 利用PCR技术。以中国人促红细胞生成素(EPO)次全基因组为模板,进行了基因修补和重组.克隆出EPO cDNA全序列。同时发现中国人EPO cDNA与国外的克隆比较有一个核苷酸的差异,导致第62位氨基酸是丝氨酸.不是亮氨酸。将人EPO cDNA基因插入表达载体pSV2-dhfr中的不同克隆位点,构建了6种不同的转移载体质粒,即psV2 dhfr/F1,pSV2/F2,pSV2 dbfT/F3,pSV2 dhfr/F4,pSV2-dhfr/G1和psV2 dhfr/G3。将它们分别转染导人COS-7细胞,结果表明6种转移载体质粒转染的细胞上清液都有明显的EPO活性。人EPO cDNA基因转移载体质粒在COS-7细胞中的表达水平高于人次全EPO基因组转移载体质粒。
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关 键 词: | 促红细胞生成素,PCR技术,基因表达 |
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