表达酿酒酵母ALAS的重组大肠杆菌胞外5-氨基乙酰丙酸的产量和纯化 |
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作者姓名: | 何晓梅 周静 程郢 范军 |
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作者单位: | 安徽农业大学生命科学学院, 合肥 230036;安徽农业大学生命科学学院, 合肥 230036;安徽农业大学生命科学学院, 合肥 230036;安徽农业大学生命科学学院, 合肥 230036 |
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基金项目: | 安徽省科学技术厅资助项目(No.06013155C)资助。 |
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摘 要: | 5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinate,ALA)由5-氨基乙酰丙酸合酶(5-aminolevulinate synthase,ALAS)催化产生。利用重组细菌在大肠杆菌合成ALA已有不少研究。重组真核生物ALAS在大肠杆菌合成ALA的研究没有报道。酿酒酵母ALAS在大肠杆菌重组表达,在摇瓶培养条件下,分析了胞外ALA的产量,重组菌的生长状况和细胞中ALAS的活性,利用两种国产树脂纯化ALA,毛细管电泳分析确定ALA纯度在LB培养基中,初始pH 6.5,含有20mmol/L的酮戊酸、20mmol/L琥珀酸和20mmol/L的甘氨酸,37℃下诱导培养12h,胞外ALA的产量为162mg /L培养基。纯化的ALA纯度达到90%。
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关 键 词: | hem1 酿酒酵母 5-氨基乙酰丙酸产量 5-氨基乙酰丙酸纯化 |
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