香蕉果实SMART cDNA文库的构建及利用PCR方法筛选香蕉Actin2基因 |
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作者姓名: | 徐碧玉 苏伟 张建斌 刘菊华 金志强 |
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作者单位: | 中国热带农业科学院生物技术研究所,热带作物生物技术国家重点实验室,海口,571101;中国热带农业科学院生物技术研究所,热带作物生物技术国家重点实验室,海口,571101;中国热带农业科学院生物技术研究所,热带作物生物技术国家重点实验室,海口,571101;中国热带农业科学院生物技术研究所,热带作物生物技术国家重点实验室,海口,571101;中国热带农业科学院生物技术研究所,热带作物生物技术国家重点实验室,海口,571101 |
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基金项目: | 海南省优秀中青年教师奖励基金项目资助 |
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摘 要: | 利用SMART(switching mechanismat5’end of RNA transcript)技术,提取果实少量总RNA,经15-25轮LD-PCR扩增获得全长ds-cDNA,构建了海南主栽的食用香蕉巴西蕉(Musa AAA Group Cavendish)果实的cDNA文库。所构建的文库容量为5×106Pfuml-1,重组率93%。利用此cDNA文库,采用96孔板PCR法筛选香蕉Actin2基因,测序结果显示,序列全长1723bp,编码区长1134bp,编码378个氨基酸,与蝴蝶兰Actin2基因序列同源率达83%,已递交GenBank,接受号692696。
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关 键 词: | 香蕉 果实 SMART cDNA文库 96孔板PCR Actin2基因 |
文章编号: | 1005-3395(2005)05-0375-06 |
修稿时间: | 2005-03-25 |
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