| 靶向E2F1的shRNA抑制眼内视网膜母细胞瘤生长 |
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| 引用本文： | 王丰,马家烈,李惠明,陈霞芳,王煜非,黄倩.靶向E2F1的shRNA抑制眼内视网膜母细胞瘤生长[J].生物化学与生物物理进展,2009,36(5):587-591. |
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| 作者姓名： | 王丰 马家烈 李惠明 陈霞芳 王煜非 黄倩 |
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| 作者单位： | 上海交通大学附属第一人民医院中心实验室,上海,200080 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973)(2004CB518804)，国家自然科学基金杰出青年项目(30325043)，上海市视觉复明临床医学中心课题(FM040102-10)，上海交通大学附属第一人民医院科学研究基金资助项目(03B02). |
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| 摘 要： | 视网膜母细胞瘤(retinoblastoma，RB)中由于Rb基因缺失或失活，转录调控因子E2F1始终处于活化状态，细胞不断增殖，E2F1活性增加是恶性肿瘤的普遍现象．根据人E2F1基因设计了3段shRNA，构建RNA干扰表达载体pSilencer-shE2F1，瞬时转染人视网膜母细胞瘤细胞株HXO-Rb-44和人肝癌细胞株SMMC-7721，通过荧光定量PCR检测E2F1表达水平的变化，PI (碘化丙锭)染色检测细胞周期各时相细胞数量以检测其对细胞周期的影响．根据筛选出的有效shRNA序列构建腺病毒载体并包装出腺病毒Ad-shE2F1，在裸鼠前房模型中，体外按50 moi的感染系数感染稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的人视网膜母细胞瘤细胞株48 h后，收集细胞，将2×105细胞注射到裸鼠眼前房内，连续观察眼内肿瘤细胞生长情况并拍照记录．通过转染肿瘤细胞株检测E2F1转录水平，筛选到1个能明显抑制肿瘤细胞内E2F1表达的shRNA序列，并使细胞周期中S期细胞数减少．经Ad-shE2F1感染的RB肿瘤细胞与对照相比较，其在裸鼠眼前房内肿瘤生长减缓．结果说明，有效抑制hE2F1表达的shRNA具有抑制体内外人视网膜母细胞瘤生长的作用．
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| 关 键 词： | 视网膜母细胞瘤 |
| 收稿时间： | 2008/9/18 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2008/11/4 0:00:00 |
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