| 空肠弯曲菌活而不可培养状态的产毒素能力及毒素基因表达的检测 |
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| 引用本文： | 杨捷琳,窦同海,顾鸣,吴仲梁. 空肠弯曲菌活而不可培养状态的产毒素能力及毒素基因表达的检测[J]. 微生物与感染, 2007, 2(1): 34-38 |
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| 作者姓名： | 杨捷琳 窦同海 顾鸣 吴仲梁 |
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| 作者单位： | 上海出入境检验检疫局食品中心,上海,200135;复旦大学遗传学研究所;法国生物梅里埃上海公司 |
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| 摘 要： | 目的 通过诱导空肠弯曲菌进入活的不可培养(VBNC)状态建立细胞学模型,用VeroE6细胞和HeLa细胞检测空肠弯曲菌产细胞膨胀性肠毒素(cytotoxic distendingtoxin,CDT)能力的改变,并在RNA水平上进一步验证毒素的表达。方法 采用4℃冷藏及-70℃冷冻的方法诱导空肠弯曲菌进入VBNC状态,利用细胞总数计算、活细胞染色计数及可培养细胞计数间接确证VBNC状态细菌的存在,细胞对于VBNC状态下的细菌仍然敏感,并用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)证实空肠弯曲菌毒素基因的表达。结果 3种不同状态的细胞计数结果表明存活细胞进入了VBNC状态,细菌经4℃冷藏及-70℃冷冻后数量减少约1个数量级,在冷冻前,细菌对细胞毒性较强,72h时70%以上细胞凋亡,冷冻后的VBNC状态细菌对VeroE6和HeLa细胞的生长仍有影响,72h时约有40%细胞进入凋亡状态。结论 低温、贫养条件下空肠弯曲菌可进入VBNC状态,用常规传统的羊血平板培养基仅能使不到10%的空肠弯曲菌复苏生长,从而可以检测,在VBNC状态时,空肠弯曲菌产毒素能力改变较大,远远低于正常状态,但仍具备产毒素的能力,也从RNA水平实验得到证实。
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| 关 键 词： | 空肠弯曲菌 活的不可培养状态 细胞检测 肠毒素 |
| 修稿时间： | 2006-08-14 |
Detection of virulence capacity and genes for viable but non-culturable Campylobacter jejuni |
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| YANG Jie-lin,DOU Tong-hai,GU Min,WU Zhong-liang. Detection of virulence capacity and genes for viable but non-culturable Campylobacter jejuni[J]. Journal of Microbes and Infection, 2007, 2(1): 34-38 |
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| Authors: | YANG Jie-lin DOU Tong-hai GU Min WU Zhong-liang |
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| Affiliation: | Shanghai Bureau Entry and Export Inspection and Quarantine, Shanghai 200135, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Campylobacter jejuni Viable but non-culturable Cell detection Enterotoxin |
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