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基因工程酶法生产N-氨基甲酰-D-对羟基苯甘氨酸反应条件的优化(英文)
作者姓名:李志强  胡卓逸  刘景晶
作者单位:中国药科大学生物化学研究室,南京,210009
基金项目:江苏省应用基础研究课题资助 (No .BJ970 80 )~~
摘    要:为了实现利用生物酶转化法生产D 对羟基苯甘氨酸 ,以工程菌E .coliBL2 1 pMD T7 dht细胞作酶源 ,对底物对羟基苯海因到中间体N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸的酶转化条件进行了优化 .酶转化的最适温度为 37℃ ,最适pH为 9 0 .在Tris HCl、磷酸盐、碳酸盐和硼酸盐 4种缓冲体系中 ,底物对羟基苯海因的转化率相近 .菌体细胞经适当冻融后 ,底物对羟基苯海因的转化率被提高 .水溶性有机溶剂DMSF、DMF和Tween 80使对羟基苯海因的转化率降低 .转化时底物和菌体的合适比例为 30g L对羟基苯海因和 10g L湿菌体 .经工程菌E .coliBL2 1 pMD T7 dht细胞催化 ,底物的转化率在 13h内可达到 96 % .所制备的产物熔点、旋光性和红外光谱等与标准品一致

关 键 词:D  L-对羟基苯海因  N-氨基甲酰-D-对羟基苯甘氨酸  D-对羟基苯甘氨酸  D-海因酶  基因工程  
收稿时间:2002-10-20
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