| 人组织激肽释放酶成熟蛋白在大肠杆菌中的高效表达 |
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| 作者姓名： | 李体远 杜珙 蔡筱彦 石之磷 黄瑞芳 陈德珩 戴勇 肖德明 |
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| 作者单位： | 暨南大学医学院第二附属医院,暨南大学医学院第二附属医院,暨南大学医学院第二附属医院,暨南大学医学院第二附属医院,暨南大学医学院第二附属医院,暨南大学医学院第二附属医院,暨南大学医学院第二附属医院,暨南大学医学院第二附属医院 深圳市人民医院临床医学研究中心,深圳518020,深圳市人民医院临床医学研究中心,深圳518020,深圳市人民医院临床医学研究中心,深圳518020,深圳市人民医院临床医学研究中心,深圳518020,深圳市人民医院临床医学研究中心,深圳518020,深圳市人民医院临床医学研究中心,深圳518020,深圳市人民医院临床医学研究中心,深圳518020,深圳市人民医院临床医学研究中心,深圳518020 |
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| 基金项目： | 深圳市科技局资助课题 (No .19990 60 14),广东省十五攻关课题 (No .C1180 1)~~ |
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| 摘 要： | 将编码人组织激肽释放酶成熟蛋白的基因片段扩增并分别克隆到原核表达载体pET2 8(b)及分泌型表达载体pET2 0 (b)中 ,使其C端融合 6×HisTag序列 .转化不同受体菌 ,IPTG诱导表达后利用SDS PAGE、免疫印记等方法对重组蛋白进行分析 .在 6株基因工程菌株中 ,均表达出分子量约30kD的激肽释放酶融合蛋白 ,其中激肽释放酶在pET2 8载体中的表达水平高于pET2 0载体 .pET2 8和pET2 0载体表达的重组激肽释放酶蛋白分别占菌体总蛋白约 2 6 %和 10 % .Western印迹分析表明 ,目的蛋白可与抗人血清KK单克隆抗体发生特异性反应 .未经纯化的激肽释放酶融合蛋白具有一定的水解苯甲酰精胺酸乙酯 (BAEE)的能力 .在大肠杆菌中获得了人组织激肽释放酶的高效表达 ,表达产物具有免疫原性和生物活力 ,这为研究其生物功能和开发基因工程药物奠定基础
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| 关 键 词： | 人组织激肽释放酶 大肠杆菌 高效表达 |
| 收稿时间： | 2003-06-20 |
| 修稿时间： | 2002-05-28 |
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