二硫键稳定的抗肝癌人源化Fv-突变体人TNFα融合基因的构建与表达 |
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作者姓名: | 孙志伟 俞炜源 吕国华 袁请安 |
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作者单位: | 1. 军事医学科学院生物工程研究所,北京100071 2. 黑龙江海伦市妇幼保健医院,海伦,152300 |
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摘 要: | 利用引物PCR和重叠延伸PCR法,将抗肝癌人源化抗体hscFv25重链可变区和轻链可变区各定点突变出一个半胱氨酸,将hTNFα改造成高抗肿瘤活性的突变体,分别原核表达重链可变区突变体、轻链可变区突变体-突变体hTNFα融合基因,然后将两种表达的产物混合进行复性,目的获得具有高稳定性和高抗肿瘤活性的抗肝癌靶向细胞因子.结果重链可变区突变体和轻链可变区突变体-突变体hTNFα融合基因在大肠杆菌中均获得高效表达.表达产物以包涵体形式存在,混合复性结果未获得活性产物.
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关 键 词: | 肝细胞肝癌 靶向细胞因子 TNFα |
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