| 摘 要： | 目的研究流感病毒裂解最佳工艺条件。方法选取BV(NYMC BX-69A)流感病毒毒株,使用BV 1801批纯化液以曲拉通Triton X-100为裂解剂,选取不同浓度、不同裂解时间、不同蛋白质含量等因素,通过每组裂解试验后获得的裂解前后血凝素含量及蛋白质含量,计算血凝素回收率、纯度;40 000倍电镜下观察裂解程度。结果裂解剂曲拉通Triton X-100体积分数为0.5%时,纯度平均值为4.73,血凝素回收率平均值为71.75%;裂解剂曲拉通Triton X-100体积分数为0.7%时,纯度平均值为3.27,血凝素回收率平均值为82.00%;裂解剂曲拉通Triton X-100体积分数为1.0%时,纯度平均值为3.87,血凝素回收率平均值为61.46%。裂解时间为1 h时,纯度平均值为4.17,血凝素回收率平均值为71.75%;裂解时间为2 h时,纯度平均值为3.88,血凝素回收率平均值为82.00%;裂解时间为3 h时,纯度平均值为3.59,血凝素回收率平均值为76.75%。蛋白质浓度为800μg/mL时,纯度平均值为3.80,血凝素回收率平均值为93.00%;蛋白质浓度为1 200μg/mL时,纯度平均值为3.92,血凝素回收率平均值为91.00%;蛋白质浓度为1 600μg/mL时,纯度平均值为4.45,血凝素回收率平均值为77.50%。结论确定了四价流感病毒裂解工艺最佳参数为裂解剂曲拉通Triton X-100体积分数为0.7%,蛋白质含量为800～1 200μg/mL,裂解时间2 h,电镜下观察病毒颗粒完全裂解,血凝素回收率较高,符合工艺标准要求,满足规模化生产。
|
