黄唇蜾赢蜂蜂毒中两个过敏原全长基因的克隆、序列分析和表达

为了进一步研究透明质酸酶的过敏活性，利用昆虫杆状病毒成功地表达了黄唇蜾赢蜂Rhynehium brunneum蜂毒的透明质酸酶。根据已报道的胡蜂科透明质酸酶和抗原5基因的氨基酸保守序列，设计合成简并引物，利用反转录多聚酶链式反应（RT—PCR）技术扩增了黄唇蜾赢蜂蜂毒透明质酸酶和抗原5的基因片段，利用RACE技术进一步获得了它们的全长基因（GenBank登录号分别为EU624135和EU624136）。按照过敏原的命名法则，分别命名为Rhyb2和Rhyb5。序列比对分析发现，这两个基因与胡蜂科的相应序列高度相似，说明对胡蜂蜂毒过敏的人群也可能对蜾赢蜂蜂毒有交叉过敏反应。但进一步分析发现，黄唇蜾赢蜂蜂毒透明质酸酶的B细胞决定表位显著不同，9个保守性氨基酸在蜾赢蜂中仅保留了3个，而且缺乏两个关键的精氨酸；黄唇蜾赢蜂蜂毒抗原5序列N端的二级结构和具有过敏活性的常见黄胡蜂Vespula vulgaris蜂毒的抗原5显著不同，有可能因此而缺失依赖其N端二级结构的B细胞决定表位。据此认为，蜾赢蜂蜂毒透明质酸酶和抗原5很可能是天然弱化的过敏原，在过敏原特异性免疫治疗上具有潜在的应用价值。