| 半合成抗体库的构建及抗Tie2 Fab抗体的筛选 |
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| 作者姓名： | 廖振林 侯利华 李建民 陈薇 童贻刚 王臣 王慧春 安小平 |
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| 作者单位： | 1. 军事医学科学院流行病与微生物学研究所,北京,100071
2. 西北农林大学,杨凌,712100
3. 佳木斯大学医学院,佳木斯,154007 |
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| 基金项目： | 北京市自然科学基金资助项目 (No 5 0 2 2 0 1 2 ) |
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| 摘 要： | 构建一个半合成抗体库 ,不经免疫制备人源抗Tie2Fab抗体。通过RT PCR方法 ,从人脐带血淋巴细胞总RNA扩增轻链基因及重链VH段基因 ,将轻链基因插入pCOMb3载体中 ,得人轻链质粒库 ;从HBsAb的Fd段基因制备含有不同长度随机化CDR3的FR3 CDR3 J CH1片段 ,然后将VH段基因与随机化的CDR3融合 ,得到Fd基因片段 ,再将其插入轻链质粒库中 ,得半合成人Fab质粒库。通过多次建库 ,获得总容量为 2× 1 0 7的半合成抗体库。其Fd段和轻链基因的重组率为 5 0 %。经 3轮淘洗 ,从噬菌体抗体库中筛选到与Tie2抗原特异结合的噬菌体克隆。测序确定抗体基因序列
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| 关 键 词： | 噬菌体抗体库 Tie2 Fab |
| 文章编号： | 0253-2654(2004)06-0037-05 |
| 修稿时间： | 2004-01-19 |
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